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背景与目的:转移是肝细胞肝癌（hepatocellular carcinoma,HCC）患者的主要死因。上皮-间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）是HCC侵袭转移的早期病理生理过程。而微小RNA（micro RNA,miRNA）广泛参与HCC转移相关基因的转录后调控。研究显示肝癌中异常上调的miR-21和miR-130b与HCC的EMT密切相关。环状RNA（circular RNA,circRNA）作为一种竞争性内源RNA（competitive endogenous RNA,ce RNA）,富含miRNA反应元件（micro RNA response elements,MRE）,可结合靶miRNA从而解除miRNA对靶基因的抑制。因此,本研究拟通过人工设计具有丰富MRE的小脑变性相关蛋白1反义转录物（antisense to the cerebellar degeneration-related protin 1 transcript,CDR1as）,使之同时抑制肝癌细胞中癌基因miR-21和miR-130b的功能,从而达到抑制肝癌转移的目的。方法:利用“碱基互补配对”原则,将CDR1as中miR-7结合位点替换为特异性结合mmu-miR-21或mmu-miR-130b的碱基序列。采用实时定量聚合酶链反应（Real-time quantitative polymerase chain reaction,qRT-PCR）检测小鼠肝癌细胞Hepa1-6内人工设计改造CDR1as（modified CDR1as,M-CDR1as）的水平及其对靶miR-21,miR-130b水平的影响。利用qRT-PCR和免疫印迹法（Western blotting,WB）在转录和蛋白水平定量M-CDR1as干预后肝癌细胞中EMT相关蛋白Vimentin,E-cadherin,N-cadherin的表达。Transwell迁移实验及划痕实验进一步验证M-CDR1as是否抑制肝癌细胞迁移能力。荧光素酶报告基因检测MCDR1as与miR-21及miR-130b结合的靶向性。将小鼠随机分组为正常组,肝癌造模组,空病毒组和治疗组。利用致癌剂二乙基亚硝胺（diethylnitrosamine,DEN）和促癌剂四氯化碳（carbon tetrachloride,CCl4）诱导C57BL/6小鼠原发性肝癌模型。利用肝组织HE染色和增殖细胞相关核抗原Ki67、肝癌特异性标志物（GOLPH2及AFP）指标的免疫组化等,验证肝癌是否造模成功。构建携带小鼠端粒酶逆转录酶（mouse telomerase reverse transcriptase,mTERT）启动子的M-CDR1as重组慢病毒进行干预。mTERT的免疫组化检测其在肝癌组织中的表达。利用qRT-PCR检测干预后各组肿瘤组织内M-CDR1as的含量。观察并记录各组干预前后癌灶的大小和数量,HE染色检测肝癌肺转移情况。结果:设计M-CDR1as以特异性结合mmu-miR-21或mmu-miR-130b。MCDR1as明显下调肝癌细胞Hepa1-6中miR-130b的水平,但miR-21的变化不具备统计学差异。Western blot结果显示,M-CDR1as组较对照组及空质粒组,间质表型Vimentin,N-cadherin表达明显被抑制,上皮标志E-cadherin则表达升高（**p<0.01）。Transwell及划痕实验显示M-CDR1as可明显降低肝癌细胞的迁移能力。荧光素酶报告基因结果显示M-CDR1as可靶向结合于miR-21及miR-130b。同时,我们建立了C57BL/6小鼠原发性肝癌模型,qRT-PCR检测到治疗组肿瘤细胞内M-CDR1as的表达,结合癌灶mTERT免疫组化阳性结果,验证了mTERT体内干预的靶向性。M-CDR1as重组慢病毒减少肝脏癌灶的大小和数量及改善肺转移的情况。结论:本研究利用circRNA-miRNA-mRNA调控网络,通过改造CDR1as从而结合吸附miR-21和miR-130b,间接上调肝癌细胞中miR-21和miR-130b靶基因的表达。在体外抑制肝癌的EMT进程,体内抑制肝癌的肺转移。因此M-CDR1as有望成为肝癌治疗的新方向。