迎春花黄酮类化合物提取分离及抗氧化活性研究

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迎春花(Jasminum nudiflorum Lindl),以叶及花瓣入药。本文通过不同提取法对迎春花中总黄酮提取进行比较研究,采用Box-Benhnken优化超声提取得到最优提取条件;采用抗氧化活性模型筛选出乙酸乙酯分离部位为活性最强部位,并进行抗衰老试验;将柱层析和高速逆流法相结合,对活性最强部位进行了化合物分离,得到4个黄酮类化合物,并对分离的化合物进行活性的测定。具体研究如下:1.索氏和超声波法相比较:索氏提取提取率为1.98%,超声波辅助提取率为3.15%。2.超声波提取通过Box-Benhnken优化提取条件,得出的最佳提取条件为:乙醇浓度68%,液固比20:1,提取时间40min,提取温度为50℃。此条件下,总黄酮提取率为3.15%,与理论值3.21%相接近。3.迎春花乙醇提取物各萃取相中总黄酮含量并进行比较:乙酸乙酯相>正丁醇相>总提取物>氯仿相>石油醚相;各萃取相及总提取物对DPPH·、OH·和O2‐以及总还原力这四个指标进行抗氧化活性分析。4.乙酸乙酯相对D-半乳糖诱导的小鼠进行抗衰老试验,试验显示乙酸乙酯相中模型可提高小鼠血清和皮肤组织中SOD、CAT、POD以及GSH活性,能抑制小鼠血清内MDA和小鼠皮肤组织MDA、Hyp含量的上升。5.利用传统的柱层析法和先进的高速逆流色谱相结合,对乙酸乙酯相中黄酮类化合物进行分离纯化,在柱层析法中以氯仿/甲醇为洗脱剂,在HSCCC中以氯仿/甲醇/水为分离系统,利用1H NMR、13C NMR、HMBC、MASS光谱学技术对分离的化合物进行结构鉴定,有4个不同的单体化合物,分别为芹菜素(Y3-5),6’-O-(3,5-O-二甲基没食子酰基)槲皮素3’-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(Y4-8),木犀草素(Y4-9-2),6’-O-(3,5-O-二甲基没食子酰基)3,5,7,3’,4’,5’-六羟基黄酮3’-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(Y4-11-1)。其中6’-O-(3,5-O-二甲基没食子酰基)槲皮素3’-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(Y4-8),6’’-O-(3,5-O-二甲基没食子酰基)3,5,7,3’,4’,5’-六羟基黄酮3’-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(Y4-11-1)为新化合物。6.采用DPPH法测定化合物的抗氧化活性,Y3-5,Y4-8,Y4-11-1清除DPPH的能力均达到90%以上,超过对照VC,表明Y3-5,Y4-8,Y4-11-1的抗氧化能力很强。同时用单体化合物Y3-5,Y4-11-1对D-半乳糖诱导的小鼠进行抗衰老试验,Y3-5,Y4-11-1可提高小鼠血清和皮肤组织中SOD、CAT、POD以及GSH活性,能抑制MDA含量。表明Y3-5,Y4-11-1对小鼠的衰老具有一定的抑制作用。
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