本研根据已发表的文献，启动子的串联能增强外源基因的表达，改造花椰菜病毒的35S启动子，将质粒pBLG双35S启动子双酶切切下，连接到克隆载体pUC18上进行测序，经序列分析后将此双35S启动子连接到克隆载体pJIT60上，与pJIT60上本身含有的双35S启动子串联连接，构建一个含两个A区，四个B区T35S，并将T35S启动子连接到克隆载体pUC18上进行测序，经序列分析后，通过酶切、连接、转化将T35S启动子连接到植物表达载体pBLGvp4-st上，构建了植物表达载体pBLGT35Svp4-st。利用农杆菌介导法，将植物表达载体pBLGT35Svp4-st和pBLGvp4-st转化苜蓿，经卡那霉素(Kan)多重筛选，获得抗性植株。 结果：T35S经序列分析后，T35S启动子两个A区同源率达到83.50％，四个B区同源率为80.31％。对植物表达载体pBLGT35Svp4-st进行BamHI和SacⅠ双酶切鉴定，可切下一大小约1491bp的目的条带，与理论值一致。对转基因苜蓿随机选取几株生长良好植株进行Western-Dot点杂交检测，结果表明：在进行Western-Dot点杂交检测时大多样品出现杂交信号。