【摘 要】
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本研究改进了分离提纯硅藻主要捕光天线(FCP)的方法,得到高纯度、高均-性的三角褐指藻FCP蛋白,通过电泳、液相色谱、质谱、吸收光谱和荧光光谱等手段研究了三角褐指藻FCP的氨
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本研究改进了分离提纯硅藻主要捕光天线(FCP)的方法,得到高纯度、高均-性的三角褐指藻FCP蛋白,通过电泳、液相色谱、质谱、吸收光谱和荧光光谱等手段研究了三角褐指藻FCP的氨基酸序列、色素组成和捕光特点等,并通过蛋白质结晶尝试FCP蛋白结晶。结果表明三角褐指藻FCP含有198个氨基酸,与高等植物LHCⅡ的序列Identity约为24%。三维结构预测显示FCP具有与LHCⅡ相似的三次跨膜螺旋框架结构,但跨膜螺旋较短,且无膜表面螺旋结构。FCP中主要结合了叶绿素(Chl)a、叶绿素c、岩藻黄素,不含叶绿素b,Chl a/c为3.0。光谱学分析表明岩藻黄素可以在水下弱光环境中有效地捕获绿光,并高效地传递至叶绿素。而岩藻黄素在400-500 nm区域吸收的光能,向叶绿素传递效率较低,预示着岩藻黄素在强光下也有一定的光保护功能。FCP中有4个叶绿素结合的保守氨基酸位点,可能是其叶绿素结合位置,但岩藻黄素的结合位置因其结构和结合位点的变化而无法预测。通过NMbClass Ⅱ试剂盒筛选得到了FCP的结晶条件,并得到晶体,优化结晶条件得到了形状大小均较好的晶体,X光衍射分辨率在2.9 A左右。
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