目的预测及确认miR-592在人结肠癌中的靶基因,并通过调控靶基因发挥生物学功能。方法1、通过在线预测软件,预测miR-592下游靶基因,筛选出与miR-592结构重叠的FOXO3A基因作为本实验的目的基因。收集20对临床结直肠癌病人的样本,应用免疫组织化学技术和免疫组织蛋白技术检测结直肠癌组织及其配对的正常肠组织中FOXO3A的表达量。2、构建双荧光素酶报告系统,将FOXO3A突变型及野生型3’UTR载体分别与miR-592 inhibitor、miR-592 mimic共转染到293T细胞中,计算相对荧光素酶活性。3、将慢病毒LV-miR592 inh和LV-miR592-NC载体分别转染到结肠癌细胞系LS174T细胞中,通过免疫蛋白印迹法分析转染了慢病毒载体后结直肠癌细胞中FOXO3A的表达量。结果1、免疫组织化学结果显示,在临床收集的20例结直肠癌病例中,FOXO3A在结直肠癌组织与配对的正常肠组织中低表达,免疫组织蛋白印迹实验结果也显示同样结果,符合miR-592对靶基因调控的猜想趋势。2、双荧光素酶报告基因结果示,miR-592可以显著降低FOXO3A的3’UTR报告基因载体的相对荧光素酶活性。3、Western blotting结果显示在抑制了miR-592表达的结肠癌细胞系LS174T中,FOXO3A的表达量也随之增加。结论FOXO3A可能是miR-592在人结直肠癌发生过程中存在的潜在靶基因。