脱细胞猪透明软骨基质/壳聚糖复合支架的优化制备

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目的在本实验中,我们联合传统的粉碎、冻干和脱细胞技术,制备出三维多孔的脱细胞猪透明软骨基质/壳聚糖复合支架。其中脱细胞猪透明软骨基质作为主体成分,少量壳聚糖作为辅助成分。同时评估支架是否适宜作为软骨组织工程的支架。方法提取猪膝关节透明软骨碎片,经过粉碎、脱细胞后获得脱细胞透明软骨基质混悬液,与壳聚糖溶液按5个不同的比例混合,制备成5组复合支架。测定支架的孔隙率、孔径、吸水率和压缩模量。随后将ATDC5细胞接种在支架上,在培养的第1、3、5、7天利用CCK-8试剂盒检测ATDC5的活性。结果脱细胞猪透明软骨基质/壳聚糖复合支架呈白色多孔疏松海绵状圆柱结构,孔隙率为70%–77%,吸水率为707%–862%,两种材料的质量比为100:1时压缩模量最大,干燥状态下为(2.253±0.592)MPa,湿润状态下为(1.786±0.348)MPa,两者差异无统计学意义。此组支架孔径在50μm–200μm之间,ATDC5细胞在此复合支架上生长形态良好,增殖曲线在7天内呈现出先慢后快的趋势。结论脱细胞猪透明软骨基质与壳聚糖的质量比为100:1的支架具有良好的孔隙率、亲水性、力学强度、生物相容性,和适宜的孔径,可为细胞提供生长、增殖、物质交换的三维空间微环境。
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