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沙棘木蠹蛾Eogystia hipophaecolus(Hua,Chou,Fang&Chen)属鳞翅目木蠹蛾科Cossidae的Eogystia属,分布于内蒙古、辽宁等地,主要以幼虫危害沙棘Hippopha rhaemnoides Linn.主干和根部,严重破坏沙棘林的生态和经济效益。气味结合蛋白(Odorant binding proteins,OBPs)是昆虫信号传导过程中的第一类关键蛋白,在选择性的识别和运输外界的气味分子中起着重要作用。本文研究了沙棘木蠹蛾13个OBPs基因在雄性触角、下唇须、足(前、中、后)外生殖器的表达规律及其序列特征;通过原核表达和免疫印迹试验从蛋白层面研究其表达特点及验证所获得蛋白的表达正确性。并综合分析了 EhipGOBPs基因和蛋白水平的表达情况,从基因和蛋白两个层面揭示EhipGOBPs功能。本研究为阐明沙棘木蠹蛾嗅觉化学感受及识别的分子机理,也为后续应用寄主植物挥发物和性信息素协调防控沙棘木蠹蛾的危害提供更多的科学依据和技术支持。结果如下:1.明确了沙棘木蠹蛾13个OBPs基因在雄性成虫触角、足(前、中、后)、下唇须和外生殖器的表达规律,进一步完善了沙棘木蠢蛾OBPs在不同感觉组织中表达规律的研究。13个OBPs在4个组织中均有表达,且表达量存在较大的差异。触角、足和外生殖器是OBPs表达的主要部位。8个OBPs在触角中有相对于其他3种组织较高的表达量;而OBP12、OBP16、OBP17、OBP24在足中有相对高的表达量;OBP19在外生殖器中特异性表达;OBPs在下唇须中的表达量均相对较低,且并未发现偏向性表达的基因。2.获得了两个普通气味结合蛋白EhipGOBPs基因的完整cDNA开放阅读框碱基和氨基酸序列。模拟了 EhipGOBP1和EhipGOBP2蛋白三维立体结构。EhipGOBP1基因完整的cNDA大小为600bp,共编码199个氨基酸,经预测其蛋白分子量约23KDa;EhipGOBP2完整的cNDA长度为501bp,编码166个氨基酸,蛋白分子量为18.9KDa。氨基酸序列分析显示,EhipGOBP1和EhipGOBP2氨基酸序列间的相似性为41.2%。EhipGOBPs均含有7个α螺旋,六个半胱氨酸形成的三对二硫键对其结构起支撑作用。3.成功实现了 EhipGOBPs蛋白的体外表达,明确了 EhipGOBPs蛋白在雄性成虫触角、足(前、中、后)、下唇须和外生殖器的的表达规律。重组EhipGOBPs蛋白均在包涵体中表达,经凝胶电泳检测,条带大小与目的片段相符,表明EhipGOBPs蛋白成功在体外表达。将制备的EhipGOBPs多克隆抗体进行沙棘木蠹蛾雄性成虫4种不同组织的蛋白免疫印迹试验,结果显示EhipGOBPs蛋白在4种组织中均有表达。