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胶质瘤是最常见、致死率最高的中枢神经恶性肿瘤,无限增殖并可以进行浸润性生长的特征致使其与正常的脑组织之间没有明显的界限,因此手术治疗难以完全切除,容易复发。基于2007年WHO的分类标准,胶质瘤可以被分为四个级别,即I、II、III和IV级,其中四级脑胶质瘤恶性程度最高,其中位生存期还不足15个月,5年生存率不足5%。近些年的研究表明,一些基因的改变,如P53突变、VEGF表达上调以及PTEN的缺失等等,都可以导致胶质瘤的发生和发展,但是,目前为止,胶质瘤发病机制仍不清楚,还需要更多的研究来阐明。Netrin-1属于分泌性层粘连蛋白家族的一员,最初是作为轴突导向因子被人们所关注。研究表明,netrin-1与其受体相互作用,介导神经元轴突的吸引和排斥。近些年的研究表明,netrin-1在肿瘤以及血管发生中发挥一定的作用。但是netrin-1在胶质瘤中的研究较少,基于体外的研究发现,netrin-1在胶质瘤肿瘤细胞中表达上调,但是其在体内胶质瘤增殖中是否发挥作用,还需要进一步的探讨。本论文中我们首先在蛋白和mRNA水平检测了netrin-1在16对新鲜临床组织样本中的表达情况,发现netrin-1在胶质瘤癌组织中表达明显高于其癌旁组织,基于Oncomine数据库分析,更进一步的表明netrin-1在胶质瘤中的表达显著高于正常的脑组织。为了更进一步地研究netrin-1与胶质瘤进程之间的关系,我们收集了62例原发和16对复发临床胶质瘤组织样本,IHC检测结果显示,随着级别的升高,netrin-1表达显著上调,并与胶质瘤的恶性程度呈正相关;随后我们分析了netrin-1的表达与已知胶质瘤临床参数之间的关系,结果显示netrin-1与胶质瘤增殖Marker Ki-67具有直接的相关性,与其他参数无相关性;相关性分析实验结果表明netrin-1与Ki-67的表达具有中度正相关;ROC曲线分析结果进一步表明,netrin-1可以作为区分胶质瘤良性和恶性的一个分子靶标,提示netrin-1是一个潜在的胶质瘤诊断指标。进一步的研究发现,沉默netrin-1之后可以抑制胶质瘤细胞的增殖,但对凋亡没有什么显著影响。体外添加netrin-1可以促进细胞的增殖、诱导NF-κB p65ser536的磷酸化、并可以引起下游靶基因c-Myc的表达上调。为了研究netrin-1如何将信号从胞外传递到胞内,我们初步检测了netrin-1受体在胶质瘤细胞以及正常脑组织和胶质瘤肿瘤组织中的表达情况,发现UNC5A受体在胶质瘤细胞以及肿瘤组织中表达丰度相对较高。随后利用慢病毒介导的系统沉默UNC5A能显著的抑制由netrin-1引起的NF-κB p65ser536磷酸化、c-Myc表达的上调以及细胞的增殖。最后,我们将获得的有效沉默netrin-1的细胞接种到小鼠脑纹状体中,通过活体观察以及对肿瘤组织中Ki-67和c-Myc的表达分析,进一步证明沉默netrin-1可以通过抑制c-Myc有效地抑制体外胶质瘤细胞的增殖以及体内原位肿瘤的生长。综上所述,我们发现在胶质瘤中netirn-1表达上调,并能通过其受体UNC5A介导NF-κB的激活,最终促进癌基因c-Myc的表达,进而促进胶质瘤的生长。