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目的明确不同部位腧穴（内关、足三里）电针预处理对心肌缺血损伤及巨噬细胞和炎症物质的影响,并从迷走神经-肾上腺轴调控炎症的角度探索其神经免疫机制。方法以6-8周SPF级C57BL/6J小鼠为研究对象,分为正常组、右颈迷走神经切断术组、肾上腺摘除术组,每组又随机分为假手术组、模型组、内关电针组和足三里电针组。各电针组在麻醉状态下选取相应腧穴进行电针干预,具体参数为:2/15Hz,疏密波,2mA,20min/次,1次/天,连续3天。最后一次干预结束30min后,1-1.5%异氟烷维持下结扎小鼠冠状动脉左前降支制备急性心肌缺血模型。根据造模前后小鼠心电图ST段变化判定造模是否成功。采用超声心动图检测造模24h后小鼠左室射血分数（LVEF）和左室短轴缩短率（LVFS）。超声检测结束后,麻醉处死小鼠,取外周血、心脏和脾脏组织。采用ELISA法检测血清中心肌肌钙蛋白I（cTnI）和促炎因子（TNF-α、IL-1β）水平。流式细胞术检测心肌组织中巨噬细胞数量和M1/M2型巨噬细胞占比,脾脏组织中性粒细胞和巨噬细胞浸润程度。实时荧光定量PCR检测组织中炎症因子（TNF-α、IL-1β和IL-10）的基因表达量。结果1.不同腧穴电针预处理对心肌缺血损伤及巨噬细胞和炎症物质的影响（1）左室心功能和心肌损伤标志物的变化:与假手术组相比,模型组小鼠LVEF和LVFS明显下降（P＜0.01）,血清cTnI水平升高（P＜0.05）;与模型组相比,电针干预内关穴或足三里穴能显著提高LVEF和LVFS,降低血清cTnI水平（P＜0.01,P＜0.05）;与足三里组相比,内关电针组LVEF和LVFS明显提高,血清cTnI水平明显下降（P＜0.05）。（2）心肌巨噬细胞含量的变化:与假手术组相比,模型组心肌组织中巨噬细胞总数增多,促炎M1巨噬细胞显著升高而抗炎M2型巨噬细胞下降（P＜0.01）;与模型组相比,内关电针组和足三里电针组心肌巨噬细胞总数减少,M1型巨噬细胞比例下调,M2型巨噬细胞比例上调（P＜0.01,P＜0.05）。（3）心肌局部炎性因子表达的变化:与假手术组相比,模型组心肌缺血区促炎因子TNF-α、IL-1βmRNA表达量增高（P＜0.01）;与模型组相比,内关电针组和足三里电针组 TNF-αmRNA（P＜0.01,P＜0.05）和 IL-1β mRNA 表达量下降（P＜0.01）;与足三里组相比,内关组心肌组织中TNF-αmRNA的表达降低（P＜0.05）。与假手术组比较,模型组IL-10 mRNA表达量有一定程度的上调,但无统计学意义（P＞0.05）,电针内关穴能够升高IL-10 mRNA表达量（P＜0.05）。（4）脾脏中性粒细胞、巨噬细胞含量和血清炎性因子水平的变化:与假手术组相比,模型组脾脏组织中性粒细胞及巨噬细胞升高（P＜0.05）,血清TNF-α和IL-1β含量升高（P＜0.01）;与模型组相比,内关电针组和足三里电针组脾脏中性粒细胞和巨噬细胞数减少（P＜0.05,P＜0.01）,血清中 TNF-α和 IL-1β水平降低（P＜0.01,P＜0.001）。2.右颈迷走神经切断术后不同腧穴电针预处理对心肌缺血损伤及巨噬细胞和炎症物质的影响（1）左室心功能和心肌损伤标志物的变化:右颈迷走神经切断术后,与假手术组相比,模型组小鼠LVEF和LVFS显著降低,血清cTnI水平升高（P＜0.01）;与模型组相比,内关电针组LVEF和LVFS显著提高,血清cTnI水平降低（P＜0.01）,而足三里电针组对LVEF及LVFS和血清cTnI水平无影响（P＞0.05）。（2）心肌巨噬细胞含量的变化:右颈迷走神经切断术后,与假手术组相比,模型组心肌组织中巨噬细胞总数增加,促炎M1巨噬细胞显著升高而抗炎M2型巨噬细胞下降（P＜0.01）;与模型组相比,内关电针组心肌巨噬细胞总数减少（P＜0.05）,M1型巨噬细胞比例下调,M2型巨噬细胞比例上调（P＜0.01）,而足三里电针组对巨噬细胞数及巨噬细胞表型无影响（P＞0.05）。（3）心肌局部炎性因子表达的变化:右颈迷走神经切断术后,与假手术组相比,模型组心肌缺血区炎症因子TNF-α、IL-1β mRNA表达量升高（P＜0.05）;与模型组相比,内关电针组TNF-α、IL-1β mRNA表达量降低（P＜0.05）。与假手术组比较,模型组中IL-10 mRNA表达量有一定程度的增高,但无统计学意义（P＞0.05）,内关电针组能够升高IL-10 mRNA表达量（P＜0.05）,而足三里电针组对心肌炎症因子水平无影响（P＞0.05）。（4）脾脏中性粒细胞、巨噬细胞含量和血清炎性因子水平的变化:右颈迷走神经切断术后,与假手术组相比,模型组脾脏中性粒细胞及巨噬细胞增高（P＜0.05）,血清炎症因子TNF-α和IL-1β含量增加（P＜0.01,P＜0.05）;与模型组相比,内关电针组脾脏中性粒细胞和巨噬细胞数减少（P＜0.05）,血清TNF-α和IL-1β含量明显降低（P＜0.05）,而足三里电针组对脾脏中性粒细胞、巨噬细胞数和血清TNF-α和IL-1β含量无影响（P＞0.05）。3.肾上腺摘除术后不同腧穴电针预处理对心肌缺血损伤及巨噬细胞和炎症物质的影响（1）左室心功能和心肌损伤标志物的变化:肾上腺摘除术后,与假手术组相比,模型组小鼠LVEF和LVFS显著降低,血清cTnI水平升高（P＜0.01）;与模型组相比,内关电针组LVEF和LVFS显著提高,血清cTnI水平降低（P＜0.01）,而足三里电针组对LVEF及LVFS和血清cTnI水平无影响（P＞0.05）。（2）心肌巨噬细胞含量的变化:肾上腺摘除术后,与假手术组相比,模型组心肌组织中巨噬细胞总数增加,促炎M1巨噬细胞显著升高而抗炎M2型巨噬细胞下降（P＜0.01）;与模型组相比,内关电针组心肌巨噬细胞总数减少,M1型巨噬细胞比例下调,M2型巨噬细胞比例上调（P＜0.05）,而足三里电针组对巨噬细胞数及巨噬细胞表型无影响（P＞0.05）。（3）心肌局部炎性因子表达的变化:肾上腺摘除术后,与假手术组相比,模型组心肌缺血区炎症因子TNF-α、IL-1βmRNA表达量升高（P＜0.05）;与模型组相比,内关电针组TNF-α、IL-1β mRNA含量下降（P＜0.05）。与假手术组比较,模型组中IL-10 mRNA含量有一定程度的增高,但无统计学意义（P＞0.05）,电针内关穴能够升高IL-10 mRNA表达量（P＜0.05）,而足三里电针组对心肌炎症因子水平无影响（P＞0.05）。（4）脾脏中性粒细胞、巨噬细胞含量和血清炎性因子水平的变化:肾上腺摘除术后,与假手术组相比,模型组脾脏中性粒细胞及巨噬细胞升高（P＜0.01）,血清炎症因子TNF-α和IL-1β含量增加（P＜0.01）;与模型组相比,内关电针组脾脏中性粒细胞和巨噬细胞数减少（P＜0.01）,血清中TNF-α、IL-1β含量降低（P＜0.01）,而足三里电针组对脾脏中性粒细胞、巨噬细胞数和血清TNF-α、IL-1β含量无影响（P＞0.05）。结论1.内关穴和足三里穴电针预处理均具有心肌保护效应,但内关穴的保护效应优于足三里穴。2.内关穴和足三里穴电针预处理均可通过促巨噬细胞表型转化、减轻心肌局部炎症、抑制脾脏免疫细胞募集、改善全身炎症水平发挥心肌保护作用。3.内关穴和足三里穴电针预处理产生心肌保护和炎症调控效应的机制不完全一致,其中足三里穴的效应与其驱动迷走神经-肾上腺轴相关,而内关穴不通过该途径产生心肌保护效应。