大米草cDNA文库的构建与盐胁迫基因的分离

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该实验以耐盐性极强的大米草为材料.首先,从蛋白质水平上比较了盐胁迫和非盐胁迫的蛋白谱带.在SDS-PAGE谱带上,发现盐胁迫下出现了分子量为27kD的特异性谱带,同时分子量为75kD的蛋白质表达明显增强.在此基础上,进一步构建了盐胁迫下大米草的cDNA文库.为了进一步筛选与耐盐性有关的cDNA克隆,分别以处于盐胁迫和非盐胁迫下的大米草的mRNA为模板,反转录合成放射性标记的单链cDNA探针.以这两种探针分别与构建的cDNA文库中的克隆杂交,以便选出与盐胁迫相关的阳性克隆.
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