WRKY转录因子是植物最大的转录因子家族之一,在植物生长发育和适应环境过程中起重要的调节作用,但不同的家族成员的功能特异性机制仍不清楚。14-3-3蛋白是一个由多基因编码的调节蛋白家族,通过以同源或异源二聚体的形式结合磷酸化的靶蛋白,影响靶蛋白的活性,亚细胞定位或稳定性等。14-3-3蛋白与WRYK家族成员的分子关联及可能作用也还鲜有报道。我们前期研究发现CaWRKY58是辣椒应答青枯菌侵染的负调节因子,本研究进一步发现CaWRKY58可与Ca14-3-3互作,并在辣椒应答低磷胁迫中起一定的调节作用,主要研究结果如下:(1)以CaWRKY58为诱饵,通过酵母双杂交技术分离辣椒cDNA文库,获得一个14-3-3阳性克隆,通过亚细胞定位发现这个Ca14-3-3分布于整个细胞,通过免疫共沉淀(CoIP)进一步验证了 CaWRKY58与Ca14-3-3的互作。(2)通过农杆菌介导的瞬间超表达、病毒诱导基因沉默(VIGS)和荧光定量PCR分析相结合的研究方法,发现CaWRKY58在辣椒叶片上瞬间超表达可显著抑制Ca14-3-3的转录表达,而Ca WRKY58基因沉默则可显著上调Ca14-3-3的转录表达;(3)通过超表达结合荧光定量PCR分析SA、JA、ET和ABA激素信号相关标记基因的表达发现,Ca WRKY58与ABA,ET信号通路相关,Ca14-3-3与SA信号通路相关;通过共同瞬间表达分析发现,Ca14-3-3可抑制CaWRKY58对CaABR1,caACO1的上调作用,CaWRKY58则可抑制Ca14-3-3对CaPR1的下调作用;(4)在磷饥饿胁迫下,研究发现辣椒植株中磷转运体AtPHO1的同源基因CaPT1和Ca14-3-3表达均显著上调,而Ca WRKY58转录表达下调;Ca WRKY58,Ca14-3-3分别瞬间表达和共表达的辣椒叶片中CaPT1的表达水平都出现下调。综上所述,CaWRKY58在辣椒抗病和适应低磷胁迫的过程中起负调节作用,CaWRKY58的这种作用通过蛋白互作的方式受到Ca14-3-3的调节。