环境高温对肉鸡回肠黏膜屏障及微生物菌群的影响

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热应激是影响家禽生产的一个重要应激因素。热应激影响家禽肠道黏膜屏障,可能与采食量下降、体温升高或肠道微生物紊乱有关。本论文研究环境高温对肉鸡回肠黏膜屏障及微生物组成的影响,探讨高温影响肉鸡黏膜屏障及微生物的原因,并分析黏膜损伤与菌群变化之间的关系,为今后通过营养措施,改善肠道健康,缓解热应激的影响提供理论依据。本论文分别开展短期和长期2项试验,短期高温试验选取28日龄雄性AA肉鸡144羽,随机分为3个处理组,即常温组(TC,21℃)、高温组(HT,31℃)和常温采食配对组(PF,21℃)。HT和TC组肉鸡自由采食,PF组的采食量与HT组一一配对,试验期为35-42日龄。长期高温试验选取21日龄雄性AA肉鸡96羽,随机分为常温组(TC,21℃)和高温组(HT,31℃)。试验期为28-49日龄。研究发现:1)短期和长期高温均显著降低肉鸡ADFI和ADG(P<0.05),显著升高F/G(P<0.05);相同采食量下高温依然显著影响ADG和F/G(P<0.05)。2)短期和长期高温均显著降低了回肠绒毛高度(P<0.05),升高血清中LPS、TNF-α和CRP的浓度(P<0.05);短期试验发现,配对组血清指标与高温组和常温组均无显著差异(P>0.05),表明环境高温对肉鸡肠道黏膜完整性的影响至少部分与采食量下降有关。3)短期高温显著提高回肠黏膜Occludin和ZO-1 mRNA的表达量(P<0.05),长期高温有提高Occludin(P=0.074)和ZO-1 mRNA(P=0.059)表达量的趋势,同时长期高温显著提高黏膜MLCK mRNA的表达量(P=0.005)。4)短期高温显著降低了回肠黏膜溶菌酶的活性(P<0.05),长期高温显著提高回肠黏膜髓过氧化物酶的活性(P<0.001),同时显著提高肉鸡回肠黏膜IL-8(P<0.001)和TNF-αmRNA(P<0.001)的表达量,表明高温可能诱导肠道的轻微炎症反应。5)短期和长期高温均显著提高肉鸡回肠菌群的物种丰富度(sobs,Chao1,P<0.05),短期高温有提高肉鸡回肠微生物的α多样性指数(shannon,P=0.066;simpson,P=0.128)的趋势;短期高温组与配对组相比,肉鸡回肠菌群物种丰富度和多样性指数均无显著差异(P>0.05),表明高温对菌群物种丰富度和α多样性指数的影响与采食量降低有关。6)短期和长期高温均显著影响肉鸡菌群的β多样性。短期高温组和配对组的β多样性无显著差异(R=0.074,P=0.198),且采食量与回肠菌群Unifrac distance的PCoA主坐标1呈显著相关(R=0.786,P<0.001),体核温度和血清皮质酮与PCoA主坐标1无显著相关(P>0.05),表明环境高温影响肉鸡回肠菌群的结构主要与采食量下降有关。7)短期和长期高温均影响肉鸡回肠微生物的组成。短期高温组和配对组肉鸡回肠微生物第一优势菌(厚壁菌门、乳杆菌目和乳杆菌属)的相对丰度显著低于对照组(P<0.05),而高温组与配对组之间无显著差异。同时发现采食量与肉鸡回肠主要菌属(TOP50)中的30个属的相对丰度呈显著相关,而体核温度和血清皮质酮只与其中个别属的丰度呈显著相关,表明高温影响肉鸡回肠微生物的组成主要与采食量下降有关,与高温的直接影响,如体温或皮质酮升高关系较小。8)短期和长期高温试验均发现,肉鸡回肠微生物中主要菌属(TOP50)中有多个属的相对丰度与血清LPS、TNF-α和CRP含量、黏膜髓过氧化物酶活性、IL-8、TNF-α和MLCK mRNA表达量显著相关,而只有个别属与隐窝深度、黏膜Occludin、ZO-1和Mucin-2 mRNA的表达显著相关,表明高温影响肉鸡回肠菌群的组成可能引起肠道炎症、黏膜完整性的变化,但对紧密连接蛋白表达的影响不大。通过2项试验可以得出:环境高温影响回肠黏膜的完整性,至少部分与采食量下降有关。环境高温提高肉鸡回肠微生物的物种丰富度,影响回肠菌群的结构和组成,这种影响主要与采食量降低有关。环境高温引发回肠黏膜炎症反应,激活MLCK,这可能是影响黏膜完整性的原因之一。
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