论文部分内容阅读
目的:探讨心力衰竭大鼠心脏功能和骨骼肌指标的变化,并通过mTOR信号通路初步探讨生脉散在改善心力衰竭大鼠的心功能和骨骼肌萎缩中的作用及机制。方法:1.行冠状动脉左前降支结扎术建立心力衰竭骨骼肌萎缩模型,术后4周采用高分辨率小动物超声仪进行心功能检测,ELISA检测大鼠血液中的NT-pro BNP含量,并通过观测大鼠体重下降情况,进而评价成模情况。2.将所有造模成功大鼠分为模型组、生脉散低剂量组(1.81g/kg/d)、生脉散中剂量组(3.62g/kg/d)、生脉散高剂量组(7.24g/kg/d),持续给药4周后进行心功能检测,检测腓肠肌长度和腓肠肌重量,心脏组织HE染色和WGA染色检测心脏左室壁厚度和心肌细胞横截面积,腓肠肌HE染色和WGA染色观察腓肠肌横截面积和肌纤维数量计数,腓肠肌组织细胞凋亡采用TUNEL法荧光染色,Real-time-PCR检测mTOR、4EBP1、p70(S6K)的m RNA的表达,Western Blot检测相应蛋白及磷酸化蛋白的表达。结果:1.造模后90%以上大鼠均出现精神状态差,毛色光泽度下降,进食明显下降及活动度差等恶病质体征;造模后4周,模型组体重明显低于造模4周前体重,差异具有统计学意义(P<0.001);中、高剂量组大鼠体重高于模型组(P<0.001),低剂量组体重高于模型组,但差异无统计学意义(P>0.05)。2.模型组IVS和LVPW明显升高,LVEF显著降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。相比于模型组,中、高剂量组能够改善IVS.s,差异具有统计学意义(P<0.05,P<0.05),高剂量组能够改善LVPW.s和LVPW.d,差异均具有统计学意义(P<0.05),与模型组相比,高剂量组能够改善LVEF,差异具有统计学意义(P<0.05)。3.ELISA检测NT-pro BNP显示模型组显著高于空白组,差异具有统计学意义(P<0.001);生脉散低、中、高剂量组均显著低于模型组,差异均具有统计学意义(P<0.05)4.HE染色显示:与空白组相比,模型组心脏室壁厚度增厚,差异具有统计学意义(P<0.05);模型组腓肠肌肌纤维横截面积显著较少,差异具有统计学意义(P<0.001)。中、高剂量组心脏室壁厚度低于模型组,中、高剂量组可增加腓肠肌纤维横截面积,差异均具有统计学意义(P<0.05)。5.WGA染色:与空白组相比,模型组心肌细胞面积增大,每高倍镜视野下腓肠肌纤维数量计数增多,差异均具有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,中、高剂量组能够降低心肌细胞的横截面积,且能够减少每高倍镜视野下腓肠肌肌纤维数量,差异均具有统计学意义(P<0.05)6.腓肠肌长度:与空白组相比,模型组腓肠肌长度减少,差异具有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,中、高剂量组能够改善腓肠肌长度,差异具有统计学意义(P<0.05)。7.腓肠肌重量:与空白组相比,模型组腓肠肌重量减轻,差异具有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,高剂量组能够改善腓肠肌重量,差异具有统计学意义(P<0.05)。8.腓肠肌细胞凋亡:与模型组相比,中、高剂量组能够显著降低凋亡指数,差异均具有统计学意义(P<0.001)9.Real-time-PCR:与空白组相比,模型组4EBP1 m RNA的表达升高,mTOR和p70(S6K)m RNA的表达降低,差异均具有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,高剂量组能够升高mTOR m RNA的表达,高剂量组能够降低4EBP1m RNA的表达,差异均具有统计学意义(P<0.05)。10.Western Blot:与空白组相比,模型组mTOR、p-mTOR、p70(S6K)、p-4EBP1和p-p70(S6K)蛋白表达降低,4EBP1蛋白表达升高,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,中、高剂量组mTOR、p-mTOR、p-4EBP1及p-p70(S6K)蛋白表达均升高,而高剂量组4EBP1蛋白表达降低,差异有统计学意义(P<0.05)结论:心力衰竭模型大鼠心功能明显低于空白组大鼠,心力衰竭大鼠会伴有骨骼肌萎缩,骨骼肌长度和骨骼肌重量都减轻。生脉散能够改善心力衰竭大鼠心功能,同时可能通过mTOR通路改善骨骼肌萎缩。