蓝靛果多酚提取纯化及其抗氧化活性与稳定性的研究

来源 :沈阳农业大学 | 被引量 : 14次 | 上传用户:hualing_xue
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蓝靛果(Lonicera Caerulea L.)果实中所含的多酚类成分较为丰富且其含量远高于其他果蔬,但蓝靛果生长的地域有限,季节性明显,产果期短,且果皮较薄,运输和贮藏过程中不易控制品质,使得蓝靛果中多酚类活性物质较易损失,故对蓝靛果中多酚物质进行分离提纯具有重要意义。本研究选用采自长白山的蓝靛果忍冬冻果作为原料,对其多酚组分提取纯化的工艺参数进行研究,确定最佳工艺条件,同时对纯化前的多酚粗提物进行了体外抗氧化活性评价分析,以及对纯化后的蓝靛果冻果中多酚成分进行稳定性和体外抗氧化能力的考察分析,具体结论如下:采用超声波辅助提取法并在单因素试验的基础上,通过三因素三水平的响应面优化试验对蓝靛果多酚的提取工艺进行了优化,确定了多酚提取的最佳工艺条件为:料液比1:25(g/mL),提取温度40℃,提取时间90min,乙醇溶液体积分数50%,超声功率500W,在此条件下获得的多酚含量高达7.52mg/g。通过对蓝靛果多酚粗提物进行体外抗氧化活性评价分析发现,蓝靛果多酚具有较强的清除超氧阴离子自由基、2,2-联氨-双-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二胺盐自由基(2,2’-azino-bis(3-ehtylbenzothiazoline-6-sulfonic acid)diammonium salt radical, ABTS+}、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl, DPPH)自由基的能力。由相关性分析结果可知,蓝靛果多酚含量与超氧阴离子自由基、DPPH自由基清除能力之间呈极显著正相关(P<0.01),与ABTS+·清除能力间呈显著正相关(P<0.05)。考察6种(XAD-7、X-5、S-8、D101、AB-8、D1400)型号各不相同的大孔树脂纯化蓝靛果冻果中多酚的吸附—解吸特性,筛选出纯化性能最佳的树脂,对其进行静态(动态)吸附—解吸工艺条件研究。结果表明:XAD-7型大孔树脂吸附蓝靛果冻果中多酚物质的过程发生的是放热反应,而且该吸附过程与Langmuir等温吸附模型和Freundlich等温吸附模型的拟合度较好;其静态试验确定的纯化工艺条件为:吸附平衡时间4 h、解吸平衡时间2 h、上样液质量浓度2.03上样液pH值4、乙醇溶液体积分数95%、乙醇pH值7;动态试验确定的纯化工艺条件为:上样液流速2 BV/h、上样量510mL、洗脱流速2 BV/h、水洗用量4 BV。在此条件下,测得蓝靛果多酚纯度由10.05%提高到81.97%,且其冻干粉呈紫黑色。探讨光照条件、氧化剂H202、还原剂Na2SO3、防腐剂苯甲酸钠及糖类等不同影响因素对蓝靛果多酚纯化物稳定性的影响,结果表明:在pH值≤3、低温避光条件下,纯化后蓝靛果多酚保存效果较好;纯化后蓝靛果多酚的耐还原能力较强,相比较而言其耐氧化能力稍弱,防腐剂苯甲酸钠对纯化后蓝靛果多酚稳定性无显著影响(P>0.05),糖的加入有助于多酚保存率的提高,使其稳定性增强。通过总抗氧化能力评价试验,分析了纯化后的蓝靛果多酚在不同条件下的抗氧化活性,发现pH值、光照、温度以及不同浓度条件下的氧化剂H2O2和糖类对纯化后蓝靛果多酚抗氧化活性的影响存在明显差异(P<0.05)。
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