ZnS:Mn量子点制备、性能及其放射增敏机制的初步研究

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目的:制备合成水溶性ZnS:Mn量子点,研究其荧光成像,磁共振增强性及放射增敏性,初步探讨ZnS:Mn量子点的放射增敏机制。方法:应用水相共沉淀法制备水溶性ZnS:Mn量子点,并采用DLS,XRD对其理化性质进行表征;运用荧光分光光度计,荧光倒置显微镜研究量子点细胞内荧光成像情况;并使用核磁共振成像仪、磁共振系统分析磁共振增强效果;在研究放射增敏性实验中,采用MTT实验检测量子点对Hela、U373细胞系的增殖抑制作用,克隆形成实验检测量子点联合电离辐射对U373细胞系的杀伤作用,并绘制细胞存活曲线;在增敏机制的探讨中,以U373细胞系为研究对象,通过ROS试剂盒检测细胞内活性氧含量,流式细胞仪分析细胞周期分布,Western Blot法测定细胞Bcl-2,Caspase-3蛋白表达。结果:1.制备的ZnS:Mn量子点水溶性好、粒径均一(约5nm),结构稳定。2. ZnS:Mn量子点在紫外灯照射下发出橙色荧光,发射光谱可见590nm处荧光峰,并可进入细胞内进行荧光成像。3.核磁共振分析仪,全身磁共振成像系统分析结果显示:ZnS:Mn量子点可显著缩短T1弛豫时间,其r1=8.05,r2=21.93,磁共振扫描可见T1图像增强;4.MTT实验结果显示:ZnS:Mn量子点可对Hela、U373细胞系产生增殖抑制作用,随着药物浓度的升高,细胞增殖活性下降,其差别有统计学意义(P<0.05);随着时间延长,细胞活性有下降趋势,但差别无统计学意义(P>0.05)。5.克隆形成实验结果及细胞存活曲线参数显示:量子点照射组(Q+R组)与单纯照射组(R组)相比,放射敏感性指标D0,SF2,N,Dq均呈现不同程度的下调,其SERD0=1.16,提示ZnS:Mn量子点对U373细胞系具有放射增敏效应。6.ROS试剂盒检测结果显示:ZnS:Mn量子点联合照射后U373细胞内ROS表达水平较单纯照射组提高,Q+R组、R组的X-Mean值分别为60.9±1.4,43.0±0.8,其差别有统计学意义(P<0.05);7.流式细胞仪检测结果显示:ZnS:Mn量子点可增强辐射诱导的细胞G2/M期阻滞,Q+R组、R组细胞G2/M期比例分别为(41.99±1.23)%、(34.03±1.58)%,其差别有统计学意义(P<0.05)。8. Western Blot结果显示:Q+R组Bcl-2蛋白表达较R组降低;而Caspase-3蛋白表达则相反。结论:1.成功制备了水溶性ZnS:Mn量子点。2.ZnS:Mn量子点具有体内荧光成像的特性,并且是一种理想的T1磁共振造影剂。3.ZnS:Mn量子点可提高U373细胞的放射敏感性。4.ZnS:Mn量子点放射增敏机制可能与提高细胞内ROS水平,诱导肿瘤细胞G2/M期阻滞以及诱导肿瘤细胞凋亡有关。
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