目的 支气管哮喘是嗜酸性粒细胞，肥大细胞，淋巴细胞等多种炎性细胞参与的呼吸道慢性炎症。外界变应原通过变态反应，激活一系列免疫反应细胞，释放炎性介质，形成哮喘的炎症反应和气道高反应性。此外，神经系统也能通过产生神经因子促进炎症形成，参与哮喘发作。 NF-κB（核因子κB）是一组重要的核转录因子，它调节许多细胞因子的基因表达，增加这些基因的产物数量。正常情况下，NF-κB与抑制因子IκB结合以无活性的形式存在于细胞浆中，当受到外界刺激（包括炎性介质、病毒及抗原等）后被激活，转位进入细胞核，与相应的炎性介质基因的启动子/增强子结合，促进这些介质的基因表达。目前，临床多应用激素治疗哮喘，但其机制是否与激素对NF-κB的抑制作用有关还需进一步的证实。本实验通过对哮喘后和激素治疗后豚鼠小气道壁内淋巴细胞和C₇-T₅脊神经节神经元NF-κB活性的研究，探讨NF-κB在哮喘发作过程中的作用及激素治疗哮喘的作用机制。 方法 1．哮喘模型的建立 将24只豚鼠（200-220克，均为雌性）随机分为4组。生理盐水组（4只）腹腔注射1ml生理盐水，10日后雾化吸入生理盐水；单纯致敏组（4只）腹腔注射1ml10％OVA（OVA与Al（OH）₃为1：1），10日后雾化吸入生理盐水（上述两组作为对照组）；哮喘组门只)腹腔注射lrnl 10％的OVA溶液，10日后雾化吸人1％OVA(不含川（OH入人待豚鼠出现哮喘反应后立即终止吸人，待自然缓解；激素组难只）操作同哮喘组，在哮喘后腹腔注射地塞米松p 人各组豚鼠雾化吸人每日一次，川日后处死。 2．取材，包埋，切片 常规灌流固定后，取下 C，－Ts脊神经节及肺组织，放人 4％PFA中后固定24小时后，移人30％的蔗糖缓冲液中至标本沉降后，取出标本进行修剪。OCT包埋后冰冻切片机切片，片厚12卜m。切片干燥后进行免疫组化染色。 3．免疫组化染色 应用免抗鼠 NF－KB抗体（抗 P65抗体，用 0．5％TritonX－100稀释为 1：200）和 SABC试剂盒及 DAB进行免疫组化染色。 4．统计学处理 用Luzex－F实时图象分析系统对实验结果进行灰度值测量，用SPSS统计软件对数据进行处理分析。 结 果 1．生理盐水组 小气道的上皮完整，管壁内有少数散在的淋巴细胞，分布于淋巴细胞胞浆内的NF—KB免疫阳性反应物质多于胞核。C，－T。脊神经节神经元NF－KB免疫阳性反应物质几乎全都分布于胞浆中，而胞核中的阳性物质很少甚至没有。经统计该组淋巴细胞和神经元核与浆染色程度差异显著河＜O．05人 2．单纯致敏组 小气道的上皮比较完整，有少量淋巴细胞分布在管壁内，淋巴细胞胞浆中的NF－KB免疫阳性反应物质多于胞核。C，－Ts脊神经节神经元的NF－KB免疫阳性反应物质几乎全都分布于胞浆中，而胞核中的阳性物质很少甚至没有。经统计该组淋巴细胞和神经元核与浆染色程度有显著性差异（P＜0． ·2·05）。 3．哮喘组 小气道的上皮不完整，管壁内乃至气道周围有大量淋巴细胞，NF－KB阳性反应物质不均匀地分布于淋巴细胞内，胞核的阳性染色深于胞浆。分布于C，－Ts脊神经节神经元胞核内的NF－KB免疫阳性反应物质多于胞浆。经统计该组淋巴细胞和神经元的核与浆染色程度差异显著什＜0．05人此外，该组小气道壁内淋巴细胞总数明显高于对照组(P＜0．05人 4．激素组小气道上皮不完整，管壁内有少量的淋巴细胞，淋巴细胞内NF－KB阳性反应物质分布不均匀，胞浆阳性染色深于胞核。另外，分布于C，－T。脊神经节神经元胞浆内的NF－KB免疫阳性反应物质多于胞核。经统计该组淋巴细胞和神经元的核与浆染色程度差异显著神＜0．05人此外，该组小气道壁内淋巴细胞总数明显少于哮喘组(P＜O．05人但与对照组比较则无显著性差异（P＞0．05）。 结 论 ＊哮喘豚鼠肺内小气道壁中的淋巴细胞和C，－T。脊神经节神经元内NF—KB会产生由细胞浆向细胞核的移位，核内的NF一KB可以促进炎症因子基因的转录，参与哮喘的发病机制。 2．抑制 NF一阳的活性可能是激素治疗哮喘的作用机制之 3．哮喘豚鼠C，－TS脊神经节神经元内NF－KB的过度激活可能会促进某些神经肽类物质的合成，从而参与哮喘的发病机制。