论文部分内容阅读
目的：B类I型清道夫受体(scavenger receptor class B type I, SR-BI)是介导胆固醇逆转运(reverse cholesterol transport, RCT)最重要的膜蛋白之一，它对动脉粥样硬化（atherosclerosis,As）有保护作用。最新研究发现，炎症反应能影响RCT，进而影响周围血管胆固醇外流及As的发生发展。血清淀粉样蛋白A(serumamyloid-a, SAA)能诱导人体巨噬细胞炎症反应，显著增加脂多糖（lipopolysaccharides, LPS）诱导的炎症产物IL-10，TNF-α，和IL-6的表达，且能抑制高密度脂蛋白的抗炎作用,促进As的进展。本实验主要观察SAA对THP-1巨噬细胞SR-BI及炎症反应表达调节的影响，并探讨其相关机制。方法：培养THP-1细胞株，用160nmol/L的佛波酯（phorbol12-myristate13-acetate，PMA）刺激细胞12小时，使其诱导分化为巨噬细胞，换无血清培养基，分小组以不同浓度的SAA（0，100，200，400，800ng/ml）处理THP-1巨噬细胞24小时，或以400ng/ml的SAA处理细胞不同时间（0，4，8，16，32小时），或以400ng/ml的SAA分别与P38激动剂(anisomycin)或抑制剂(SB203580)共同处理细胞24小时，分别采用RT-PCR检测SR-BI mRNA的表达，Western blot检测磷酸化P38蛋白的表达，Western blot及细胞免疫组织化学方法检测细胞SR-BI的表达，ELISA检测炎症因子（MCP-1、TNF-α、IL-1β）的表达。结果：与空白对照组相比，SAA处理细胞后，炎症因子（MCP-1、TNF-α、IL-1β）的表达上调，而SR-BI mRNA及蛋白质的表达受到抑制，这种效应呈浓度和时间依赖性，并且磷酸化P38蛋白质的表达也上调；与SAA单独处理组比较，SAA与P38激动剂共同处理细胞后，其SR-BI表达下调，炎症因子及磷酸化P38蛋白表达增加；而SAA与P38抑制剂共同处理细胞后，其SR-BI表达相对增加，炎症因子及磷酸化P38蛋白表达相对减少。结论：SAA增加THP-1巨噬细胞炎症因子（MCP-1、TNF-α、IL-1β）的表达，抑制SR-BI的表达，促进THP-1巨噬细胞炎症反应；SAA的作用可能与P38蛋白的磷酸化有关，P38-MAPK信号途径可能参与了SR-BI的表达调节及SAA刺激的THP-1巨噬细胞炎症反应。SAA通过P38-MAPK信号途径抑制SR-BI的表达，促进炎症反应，可能发挥促As的作用。