FAP对体外内皮细胞增殖及其小管形成的影响

来源 :哈尔滨医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:slie726
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目的:观察成纤维细胞在体外对内皮细胞血管生成的作用,进而探讨表达于成纤维细胞的成纤维细胞激活蛋白(fibroblast activation protein,FAP)在体外对内皮细胞的增殖和小管形成的影响。  方法:体外培养人脐静脉内皮细胞EA.hy926和人胚肺成纤维细胞MRC-5,光镜观察两种细胞形态,免疫荧光检测FAP在两种细胞上的表达,并于共培养模型中观察成纤维细胞MRC-5在体外对内皮细胞EA.hy926血管生成的作用。应用不同浓度FAP(0pmol/L,300pmol/L,600pmol/L,1200pmol/L)单独处理内皮细胞,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测不同浓度FAP对内皮细胞增殖的影响,划痕愈合实验分析其在6h和12h时对内皮细胞迁移作用影响并使用三维胶模型研究内皮细胞在其影响作用下的小管形成情况。  结果:两种细胞光镜下形态有所不同,人胚肺成纤维细胞MRC-5表面可观察到有FAP的表达,而内皮细胞上FAP无表达。共培养条件下,表达FAP的成纤维细胞对内皮细胞有促血管生成作用,而单独内皮细胞培养则未观察到血管生成。FAP单独作用内皮细胞情况下,与不加FAP的正常对照组相比,FAP可以诱导人脐静脉内皮细胞EA.hy926增殖(P<0.01)和迁移(P<0.05),并能促进内皮细胞小管样结构的形成(P<0.01)。无论是增殖、迁移还是小管形成实验,600pmol/L,浓度的FAP处理组作用均较其他组明显增强(P<0.01)。  结论:本实验验证了以前有关成纤维细胞在体外对内皮细胞有促血管生成作用的研究,可观察到表达FAP的人胚肺成纤维细胞MRC-5对人脐静脉内皮细胞EA.hy926也有促血管生成作用,推测FAP在其中的可能起到一定作用,并通过FAP单独作用内皮细胞,首次证明FAP在体外可促进人脐静脉内皮细胞增殖、迁移和小管样结构形成,为进一步研究FAP在血管生成中的机制提供了理论基础。
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