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荷叶为睡莲属植物莲（Nelumbo nucifera Gaertn）的叶片,在全世界分布广泛,是药食两用植物。近年来研究表明,荷叶具有降脂减肥、抗自由基、抗氧化、抗衰老、抑菌与抗病毒等多种生理功能,其中黄酮为其主要活性物质之一,而且黄酮类化合物还具有降血糖作用。本文旨在通过对荷叶黄酮的提取、分离纯化,继而对其进行深度研究,对分离得到的荷叶黄酮进行葡萄糖激酶激活研究,为有效利用荷叶资源提供理论基础。为此本论文开展了以下工作:1通过单因素、Plackett-Burman设计和响应面分析法,研究了超声波辅助提取荷叶黄酮的最佳工艺条件。以荷叶总黄酮提取率为指标,通过单因素实验确定了荷叶黄酮提取工艺的参数范围,通过Plackett-Burman设计和响应面分析法确定了最佳提取条件。结果表明,最佳提取条件为乙醇浓度67%,液固比34∶1,超声提取40 min,提取3次,该条件下荷叶总黄酮提取率为3.17%。2采用大孔树脂和聚酰胺对荷叶黄酮进行纯化。通过静态吸附—解吸实验,从HPD-100、HPD-100 A、HPD-400 A和聚酰胺中筛选出聚酰胺对荷叶黄酮进行纯化,通过研究径高比、上样液浓度、水洗量、洗脱剂浓度和用量,确定出最佳纯化工艺。结果表明,聚酰胺对荷叶黄酮具有较好的吸附和解吸能力,最佳吸附条件∶径高比1∶6,上样液浓度10.668 mg·mL-1;最佳解吸条件:5倍柱体积的70%乙醇作为洗脱剂。3采用聚酰胺柱层析法分离荷叶黄酮,得到A、B、C和D四个组分,经薄层色谱法检测,组分D中主要含有槲皮素,结合高效液相色谱法测定槲皮素的含量,此方法的相对标准偏差为7.9%,平均回收率为88.6%,测得每克干荷叶粉中槲皮素的含量为0.17 mg。4采用自制固相萃取小柱结合HPLC法测定荷叶中槲皮素的含量,确定了固相萃取柱的洗脱剂用量为14 BV,该方法的相对标准偏差为9.08%,平均回收率为99.49%。5采用自制毛细管填充固相微萃取柱结合HPLC法测定荷叶中槲皮素的含量,确定了该固相微萃取柱的上样液体积为25μL,洗脱剂用量为14 BV,该方法的相对标准偏差为4.61%,平均回收率为89.55%。6对荷叶粗提物及组分A、B、C、D进行GK活性的筛选,得到了具有激活GK活性的组分C,该组分的半激活浓度(EC50)为0.0803 mg·ML-1。