肠易激综合征(Irritable bowel syndrome,简称IBS)是临床上的常见疾病,胃肠动力异常、内脏感觉致敏以及神经精神的改变是IBS的主要临床特征。中医认为IBS的病机在于肝郁脾虚。患者多因情志失调、恼怒抑郁、忧虑过度以致肝气郁结,失其疏泄,脾失健运,导致IBS临床征状的产生。蜘蛛香是西南地区多民族共用的传统草药,现代研究表明具有抑制胃肠运动、镇静、镇痛、抗惊厥等药理作用,对于改善IBS患者的临床综合征状具有积极作用。蜘蛛香治疗IBS的有效物质基础主要是环烯醚萜类成分,但该类成分化学性质不稳定,易发生降解反应,次级降解产物缬草醚醛的镇静活性和稳定性均强于环烯醚萜类成分,因而有研究认为治疗IBS活性成分不是环烯醚萜类成分,而是其次级降解产物。本课题通过对蜘蛛香中环烯醚萜类降解产物的提取工艺、药理活性、成型工艺以及质量评价方法的研究,旨在深入了解该类物质的特性,科学合理的评价其性质,从而为深层次的药理、药效学研究提供物质基础,为治疗IBS的药物研发与应用提供理论依据和技术支持。主要研究内容及结果如下:(1)对蜘蛛香降解产物缬草醚醛化学结构的鉴别,并制备供含量测定用缬草醚醛对照品。将蜘蛛香乙醇提取部分通过进行反复分离、纯化,得到化合物缬草醚醛;并对结构、性质、光谱数据、制备积累方法进行了研究,对照品的纯度检查结果为:缬草醚醛对照品纯度＞98%。(2)建立了高效液相色谱法(HPLC)测定缬草醚醛含量。色谱条件为:乙腈:水(50:50)为流动相:检测波长为287 nm:流速0.95 mL/min:柱温35℃。线性回归方程为:Y=0.0021X-0.0014,R~2=1;缬草醚醛的进样量在0.404～2.828μg范围内,与其峰面积呈良好的线性关系。精密度、重现性、稳定性、回收率实验均＜3%,符合含量测定要求,药材中缬草醚醛含量为8.98mg/g。(3)优化了蜘蛛香中环烯醚萜类降解产物的提取工艺,采用正交实验设计,以环烯醚萜类降解产物缬草醚醛为指标,得出最佳提取条件为:药材过24目筛,70%的乙醇12倍量先浸润0.5h,回流提取2次,每次3 h;对AB-8型大孔树脂分离富集缬草醚醛工艺进行筛选,确定各工艺参数为:每1mL树脂对缬草醚醛的最大吸附量为22.6mg;样品液最适浓度为0.2g生药/mL(即缬草醚醛1.42mg/mL),吸附流速为2BV/h,洗脱溶剂为90%乙醇,洗脱流速为2BV/h,洗脱至5倍柱体积。(4)蜘蛛香提取物—缬草醚醛治疗IBS药效活性及服用剂量的筛选。通过蜘蛛香提取物对利血平小鼠胃肠运动作用、镇痛作用和正常小鼠胃肠运动实验筛选缬草醚醛治疗IBS的服用剂量。结论:蜘蛛香各个剂量对于胃肠运动和神经精神均有不同程度的改善作用,缬草醚醛含量为12.4～24.85mg时,治疗效果较为明显,故拟定服用剂量18mg。(5)蜘蛛香缓释骨架片的制备工艺研究。根据片剂成品考察指标对蜘蛛香缓释骨架片的骨架材料进行筛选,并考察其制备工艺。结果:用乙基纤维素(EC),羟丙基甲基纤维素(HPMC)作为蜘蛛香缓释骨架片的骨架材料,制备的片剂符合各项成品考察指标,可以取得比较理想的缓释效果。最佳处方为蜘蛛香提取物:HPMC(K4M):EC:乳糖:硬脂酸镁=85:150:15:48.5:1.5。(6)蜘蛛香缓释骨架片的质量标准研究。采用薄层色谱法对片剂中的蜘蛛香进行了定性鉴别;采用高效液相色谱法对片剂中缬草醚醛含量进行了测定并确定了含量限度;测定了缓释骨架片的释放度。结果:建立了蜘蛛香缓释骨架片的质量标准,其方法稳定、准确性高、特异性强、重现性好,可以很好的控制药物的质量。(7)本研究的创新点在于:1.首次将蜘蛛香中环烯醚萜类降解产物缬草醚醛成分作为治疗IBS的物质基础,进行较全面的研究,为新型治疗IBS药物的研发奠定基础。2.首次对蜘蛛香降解产物提取工艺和剂型进行研究,为蜘蛛香中该类成分的进一步研究奠定了基础,同时也可为其它类型的降解产物的提取工艺研究提供思路和借鉴。3.首次建立了评价蜘蛛香药材中降解产物缬草醚醛指标的HPLC含量测定方法,并对缬草醚醛服用剂量进行了考察。