维生素C对大鼠血管平滑肌细胞增殖及凋亡的影响

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一、大鼠血管平滑肌细胞的分离培养与鉴定;用0.2﹪胶原酶消化法进行大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞(VSMCs)的分离培养,并通过倒置相差显微镜及透射电镜(TEM)对培养的细胞进行鉴定.培养的细胞外观呈长梭形,成束平行排列,部分区域细胞多层重叠,部分区域仅为单层,高低起伏,呈现平滑肌细胞特征性的"峰-谷"状生长.二、维生素C对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响;用不同浓度维生素C(VC)孵育VSMCs,分别于24h、48h及72h,用台酚蓝拒染法进行活细胞计数,绘制VSMCs生长曲线;并且在VC孵育VSMCs 24h后,采用四唑盐比色试验测定细胞存活率.三、维生素C对大鼠血管平滑肌细胞凋亡的影响;用不同剂量的VC孵育VSMCs48h后,分别于倒置相差显微镜和荧光显微镜(细胞经吖啶橙染色处理)下观察其变化并用CCD系统拍照;并采用流式细胞仪技术(细胞经碘化丙啶染色处理)对细胞凋亡进行定量分析.结论:维主素C对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响呈现双向效应,在低浓度时能促进血管平滑肌细胞增殖,而高浓度时则抑制其增殖,并对大鼠血管平滑肌细胞的凋亡呈现明显的促进作用.
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