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本实验以半滑舌鳎为养殖对象,探讨饲料中不同水平的花生四烯酸(ARA)含量、DHA/EPA比例对亲鱼性腺中性类固醇激素合成的影响以及饲料中不同水平的DHA/EPA比例对半滑舌鳎幼鱼生长、脂肪酸组成和脂肪代谢的影响。实验在室内流水养殖系统中进行,实验期间水温范围为20?26℃;盐度,30?31;p H,7.4?8.5;溶解氧,5?7mg L-1;光照强度100?500lx。实验结果如下:1、饲料中花生四烯酸含量对半滑舌鳎亲鱼性腺中性类固醇激素合成的影响以3龄未发育的半滑舌鳎亲鱼为实验对象,来研究饲料中花生四烯酸(ARA)对性类固醇激素合成量以及合成过程中关键蛋白基因表达的影响。实验配制三组不同ARA含量的等氮等能饲料:对照组(C,ARA占总脂肪酸0.58%)和低水平组(ARA-L,ARA占总脂肪酸5.14%)、高水平组(ARA-H,ARA占总脂肪酸15.44%)。在室内流水养殖系统中进行为期3个月的养殖实验。实验结果表明,与对照组相比,ARA添加组显着降低了雌鱼血清中雌二醇的含量(P<0.05),但升高了雄鱼血清中睾酮的含量(P<0.05)。饲料中高水平的ARA显著降低了卵巢中芳香化酶的基因表达量(P<0.05),但显著增加了精巢中3β-羟基类固醇脱氢酶(3β-HSD)的基因表达量(P<0.05)。在成熟卵巢中,低水平的ARA显著降低了促卵泡激素受体(FSHR)、3β-HSD和17β-羟基类固醇脱氢酶(17β-HSD)的基因表达量(P<0.05);然而,在未成熟的卵巢中,其显著增加了FSHR、类固醇生成急性调节蛋白(St AR)、胆固醇侧链裂解酶(P450ssc)、3β-HSD和17β-HSD的基因表达量(P<0.05)。在所有性腺中,17α-羟化酶(P450c17)对饲料中ARA的反应与其它性类固醇激素合成蛋白都不同。饲料中的ARA被优先累积在舌鳎性腺中,ARA在发育成熟雄鱼的性腺、肝脏、肌肉中累积量最高,而在发育成熟雌鱼中的累积量最低。与雌鱼相比,雄鱼的性腺中含有高水平的DHA,但是在肝脏中DHA含量相对较低。总之,实验结果表明:饲料中ARA能够调节半滑舌鳎亲鱼性腺中性类固醇激素的合成并在性腺中实现累积,而且这些过程都因鱼的性别和成熟阶段而异,与发育成熟的雌鱼相比,发育成熟雄鱼和未发育成熟的雌鱼可能需要更高水平的ARA。2、饲料中DHA/EPA比值对半滑舌鳎亲鱼性腺中性类固醇激素合成的影响以3龄未发育的半滑舌鳎亲鱼为实验对象,研究饲料中DHA/EPA的比例对性类固醇激素合成量以及合成过程中关键蛋白基因表达的影响。实验配制三组不同DHA/EPA比例的等氮等能饲料:D/E-0.68组(DHA/EPA比例为0.68)、D/E-1.09组(DHA/EPA比例为1.09)和D/E-2.05组(DHA/EPA比例为2.05)。在室内流水养殖系统中进行为期3个月的养殖实验。实验结果表明:与D/E-0.68组相比,D/E-1.09组显著提高了雌鱼血清中雌二醇(E2)的含量(P<0.05),而D/E-2.05组显著提高了雄鱼血清中睾酮(T)的含量(P<0.05)。D/E-1.09组显著提高了卵巢中促卵泡激素受体(FSHR)、17α-羟化酶(P450c17)、类固醇生成急性调节蛋白(St AR)及3β-羟基类固醇脱氢酶(3β-HSD)基因的表达量(P<0.05)。而在精巢中,D/E-1.09组和D/E-2.05组提高了FSHR、胆固醇侧链裂解酶(P450ssc)以及3β-HSD的表达量,P450c17表达量在D/E-2.05组显著高于其他两组(P<0.05)。鱼体组织中DHA/EPA比例随饲料中DHA/EPA比例的上升而上升(P<0.05),但是各实验组中DHA的含量都明显高于EPA。性腺中雄鱼的DHA的含量明显的高于雌鱼,说明雄鱼可能需要更高的DHA。总之,实验结果表明:在DHA+EPA总量一定的情况下,饲料中DHA/EPA比例能够调节半滑舌鳎亲鱼性腺中性类固醇激素的合成,而且这些过程都因鱼的性别而异,雄鱼可能需要更高DHA/EPA比例的饲料。3、饲料中DHA/EPA比值对半滑舌鳎幼鱼的生长性能、脂肪酸组成以及脂肪代谢相关基因表达的影响以半滑舌鳎幼鱼(23.40±0.08g)为实验对象,来研究饲料中不同DHA/EPA的比例对半滑舌鳎幼鱼生长性能、脂肪酸组成以及脂肪代谢相关基因表达的影响。配制六组不同DHA/EPA比例的等氮等能饲料,DHA/EPA的比例是0.61、1.02、1.46、1.91、2.32以及2.75,分别表示为D/E-0.61、D/E-1.02、D/E-1.46、D/E-1.91、D/E-2.32以及D/E-2.75组。在室内流水养殖系统中进行为期80天的养殖实验。实验结果表明,随饲料中DHA/EPA比例的上升,终末体重、增重率(WG)出现先上升后下降的趋势(P<0.05),并且在DHA/EPA比例为1.46和1.91时出现最大值。饲料效率(FE)也出现类似的变化趋势。但是,摄食率(FI)、成活率(SR)、肝体比(HSI)、脏体比(VSI)及肥满度(CF)在各处理组间没有显著差异(P>0.05)。鱼体脂肪含量随着饲料中DHA/EPA比例升高也出现先上升后下降的趋势,并在DHA/EPA比例为1.02和1.46时出现最高值(P<0.05)。鱼体组织脂肪酸组成与饲料中脂肪酸组成基本一致,并且在各处理组鱼体组织中DHA的含量都远远高于EPA的含量。随着饲料中DHA/EPA比例的上升,PPARα2(过氧化物酶体增殖剂激活受体α2亚型)和ACO3(乙酰辅酶A氧化酶3亚型)基因表达量呈现上升的趋势(P<0.05),PPARγ(过氧化物酶体增殖剂激活受体γ亚型)、SREBP(胆固醇调节元件结合蛋白)、ACC(乙酰辅酶A羧化酶)、FAS(脂肪酸合成酶)以及ATGL(甘油三酯脂肪酶)基因表达量呈现先上升后下降的趋势(P<0.05),GPAT4(甘油-3-磷酸酰基转移酶4亚型)基因在DHA/EPA比例为1.02、1.46以及2.75组的表达量显著高于其他组(P<0.05),而CPT-1α(肉毒碱棕榈酰转移酶1α亚型)基因和PPARα1(过氧化物酶体增殖剂激活受体α1亚型)基因在各处理组间没有显著的差异(P>0.05)。综上所述,在DHA+EPA总量一定的情况下,饲料中适宜的DHA/EPA比例(1.46-1.91)能显著提高半滑舌鳎幼鱼的生长性能,并调节鱼体的脂肪沉积代谢。以增重率为评价指标,采用二次曲线分析,得出半滑舌鳎幼鱼配合饲料中最适DHA/EPA比例为1.67。