农杆菌介导水稻转ICE1基因的研究

来源 :黑龙江八一农垦大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wangcong1001
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
拟南芥.ICEl基因是重要冷诱导调节基因。ICEl基因在低温下被激活,刺激CBF/DREB基因表达,CBF/DREB转录因子再结合在COR基因启动子的CRT/DRE(CCGAC)元件上,与其它蛋白(RNA聚合酶Ⅱ等)相互作用,调控下游一系列冷诱导基因(COR)和在植物寒冷适应中起作用的其它基因的表达,提高植物抗寒性。 目前,水稻中己发现一些与拟南芥CBF/DREB同源的OsDREB调控基因及一些冷诱基因(COR),如果将冷诱导基因ICEll在水稻体内强烈表达或诱导表达,就有可能培养出耐寒的水稻品种,我们利用实验室已经克隆的.ICEl基因,构建组成型启动子CaMV35S和拟南芥冷诱导启动子rd29A调控ICEl基因的两个植物表达载体:pCAMBIAl300-35S-ICEl-polyA和pCAMBIAl300-rd29A-ICEl-polyA,建立了垦鉴稻10号成熟胚愈伤组织再生体系,利用根癌农杆菌介导的方法分别用两种植物表达载体转化垦鉴稻10号成熟胚愈伤组织,希望获得耐寒的水稻品种。实验共得到拟转35S-ICEl-polyA的潮霉素抗性植株76株,移栽成活49株,经.PCR检测17株呈阳性,个别植株有矮化现象发生:得到拟转rd29A-ICEl-polyA的潮霉素抗性植株33株,移栽成活20株,经PCR检测4株呈阳性,植株没有矮化现象发生。部分PCR阳性的转35S-ICEl-polyA植株T<,0>代经Southern杂交检测呈阳性。对Southern杂交呈阳性的T<,0>代植株自交的种子(T<,1>代)进行潮霉素抗性测定,测定结果表明,与未转基因水稻相比,T<,1>代表现出对潮霉素较高的抗性,经卡方(X<2>)适合性检验表明,5个T<,0>代株系自交形成的种子表现出3:1分离方式,占71%,表明外源基因在转基因植株的染色体上是单拷贝插入的;有2个T<,0>代株系自交形成的种子没有表现出3:1分离方式,可能是外源基因以多拷贝、多位点的方式插入水稻染色体上。抗寒能力检测结果表明,在相同低温胁迫条件下T<,0>-11和T<,0>-39株系的Hyg抗性后代植株死亡率明显低于未转基因对照。脯氨酸含量测定结果表明,低温处理后T<,0>-11和T<,0>-39株系的Hyg抗性后代叶片中脯氨酸含量增幅明显高于未转基因对照。上述结果表明,转ICEl水稻提高了抗寒能力。
其他文献
克拉玛依广播电台是1979年11月正式成立的。在新疆石油管理局和克拉玛依市党委领导下,我们台紧密围绕局市各个时期的中心工作,突出一个油字,一切服从于和服务于油田的现代化
饲用高粱的品质性状主要包括粗蛋白、粗纤维、粗脂肪、粗灰分、无氮浸出物、糖锤度、蜡粉等。本文研究了其茎秆这些性状的积累规律、遗传规律以及性状间的相关性,设计了三个试
现在,有些国际新闻特写,并不是记者目睹的事件和亲自采访所得,却冠以“特写”的栏头。这样的文章缺少感染力,使特写的功能贬值,这是个值得引起重视的问题。这里举一实例作些
以300 W汞灯为模拟太阳光光源,在滤去波长小于290 nm光的Pyrex试管中,考察了淡水和海水中不同浓度的硝酸根离子(NO3-)对除草剂2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)光解动力学的影响,并利
本研究在2004年、2005年两年的田间试验基础上,结合气象数据,借鉴RCSODS和CERES等模型的建模思想,分别建立了花生发育动态模型、叶龄模型、叶面积动态模型、干物质积累以及产
本试验利用SSR分子标记技术对四川农业大学玉米研究所经三性(一致性,稳定性,特异性)鉴定的新选优良玉米自交系共59份材料进行了遗传多样性研究,并对其中20份玉米骨干系(包括5个代表四大类群的自交系)进行了DNA指纹图谱数据库的构建研究,主要结果如下:1.筛选出了一批对59份新选自交系具有较高多态性的SSR引物;并筛选出了一套适用于构建20个骨干自交系指纹图谱的核心引物。2.利用SSR分子标记技术研
为了阐述茎生长的调节机制,本文用四种基因型烟草:农大202、K326、K326×农大202和8277作为研究对象。其中农大202为矮杆变异类型;8277为高杆类型;K326株高适中。研究烟草大田生长期间的茎尖与叶片的内源激素含量变化动态及其平衡关系,分析了内源激素与烟草茎生长和钾含量的关系,并结合外源激素的调节效应探讨了植物激素影响烟草茎生长和叶片钾含量的生理机制。主要结果如下: 1.在生长
以10个淀粉含量不同的自交系为亲本,按照Griffing双列杂交模式组配正反90个杂交组合,在河南南阳、郑州、浚县3个地点种植F1代杂交种,利用MARX-Ⅰ型近红外品质分析仪测定籽粒淀粉
种质资源匮乏是限制我国玉米育种和生产水平进一步提高的重要因素,为缓解种质遗传基础狭窄的矛盾,玉米育种工作者做了大量的研究。本文以四川农业大学玉米研究所和四川农科院作物所提供的5个玉米人工合成群体及其与9个测验种按不完全双列杂交设计组配的45个组合为供试材料,对5个玉米人工合成群体主要农艺经济性状表现、杂优类群以及配合力效应做了较为全面系统的研究,结果表明: 1.除散粉期、抽丝期、蜡熟期单株持
棉花是唯一可由种子生产纤维的农作物,棉花生产需要投入较多劳动力。由于劳动力的转移,我国的人工价格不断上涨,植棉的比较效益和经济效益下降,导致近年我国棉花生产的连年滑