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花色苷具有多种生物功能,它可以抑制、清除自由基的产生,激活抗氧化酶体系,抑制癌细胞的转移和增殖等。纳米脂质体作为一种广泛应用于活性物质的包埋载体,是因为其自身具有磷脂双分子层这种类膜结构,因此通常被用于靶向细胞的药物载体。纳米脂质体作为一种活性物质载体,具有缓释、易被细胞摄取、作用稳定、被动靶向性、无不良反应等优势。目前,脂质体作为药物载体应用十分广泛,而纳米脂质体是人们设计的较为理想的脂质体活性物质载体。生物活性物质经过纳米脂质体包埋后,可以有效地延长活性物质的作用时间并相应的增加其功效。本课题综合多种方法,分别观察C3G纳米脂质体进入Caco-2细胞的形式、途径以及进入细胞后的分布。同时探究C3G纳米脂质体进入细胞后的变化规律和抗氧化活性作用方式及部位。本课题研究内容主要有以下几个方面:(1)通过单因素试验及响应面优化试验,确定得到最优制备工艺条件为花色苷浓度0.21 mg/mL、脂胆比2.83:1 mg/mg、pH(PBS)为6.75时,理论最佳包封率为67.22%。鉴于实际实验操作客观因素,选取制备工艺为花色苷浓度0.2mg/mL、脂胆比2.8:1 mg/mg、PBS的pH为6.75,在优化工艺下,测定花色苷纳米脂质体的包封率及粒径、多分散系数分别为67.36%、228.30 nm和0.183。(2)花色苷纳米脂质体随着储存时间的增加,花色苷纳米脂质体逐渐被氧化导致包封在其内部的花色苷发生一定程度的泄露,花色苷纳米脂质体的粒径变化不大但会逐渐增大;在模拟胃肠液中,花色苷纳米脂质体逐渐释放出花色苷,在0-1 h内泄露率较低,比较稳定;金属离子对花色苷纳米脂质体稳定性的影响较小且无显著性差异。(3)以Caco-2和GES-1细胞为研究对象,观察C3G纳米脂质体进入细胞的形式和途径以及进入细胞后的分布。发现根皮苷和根皮素可明显抑制花色苷的转运,而根皮苷和根皮素分别作为SGLT1和GLUT2的抑制剂,说明SGLT1和GLUT2均参与了花色苷在小肠的吸收。Caveolae途径没有参与脂质体的内吞,大胞饮和clathrin介导的内吞是花色苷纳米脂质体入胞的主要途径。(4)确立了H2O2浓度为800μmol/L作用于GES-1细胞并孵育24 h建立的H2O2氧化诱导损伤模型。对不同浓度的花色苷及花色苷纳米脂质体处理GES-1和Caco-2后细胞的凋亡和周期等因素进行了研究,发现Caco-2细胞会在花色苷和花色苷纳米脂质体处理下生长受到抑制,而GES-1细胞受其影响较少。同时对诱导损伤下细胞的活性氧进行了测量,发现200μg/mL下的花色苷及花色苷纳米脂质体对降低胞内ROS的效果最好。