人口老龄化及生活水平的提高,心血管病的发病率持续增加,今后10年仍将快速增长。心绞痛是临床上较严重的心血管疾病,时辰药理学表明,高血压、心绞痛、心肌缺血等疾病发病时间多为清晨和上午,脉冲给药系统按照疾病治疗需要择时释放药物,能达到有效治疗。盐酸曲美他嗪是第一个作用于心肌细胞代谢的抗心绞痛药物,通过增加冠脉血流量及改善心肌氧的供需平衡保护心肌,疗效显著。盐酸曲美他嗪用于心绞痛的治疗,适合制成脉冲给药,对其进行研究与开发具有较高的临床应用价值。以盐酸曲美他嗪为模型药物,采用薄膜包衣技术制备盐酸曲美他嗪脉冲片,控制药物释放时滞,达到脉冲释药目的。对脉冲片的体内外分析方法进行方法学研究和验证；对自制脉冲片进行质量研究及稳定性考察。通过数学模型研究其体外释药机理；通过Beagle犬单剂量口服市售普通片和自制脉冲片进行体内药物动力学研究,进行生物等效性评价,同时计算相对利用度。1处方前研究建立HPLC法检测盐酸曲美他嗪原料含量及有关物质,方法学验证表明,所采用的分析方法专属性好、灵敏度和精密度高,适合用于检测盐酸曲美他嗪原料。原料溶解度好,在pH值1.0～7.4范围内,不随pH值变化而改变。原料稳定,容易吸湿,需要密闭保存。考察了市售盐酸曲美他嗪片(商品名：万爽力(?))在4种溶出介质中溶出不受pH值影响。为盐酸曲美他嗪脉冲片的处方筛选、制备工艺确定及释放介质的选择等提供依据。2盐酸曲美他嗪脉冲片制备通过原辅料相容性试验确定与盐酸曲美他嗪相容的辅料种类。通过崩解性能试验和药物释放时滞,确定崩解剂CMS-Na、L-HPC及用量；采用比较法,以粉末的流动性、片芯脆碎度为指标,对处方中填充剂微晶纤维素、甘露醇用量进行筛选。采用薄膜包衣法制备脉冲片,对增塑剂种类及用量、EudragitL100与EC的比例、包衣增重进行了筛选,通过正交试验优化包衣液处方,以药物时滞4小时为评价指标。片芯处方确定为每片含盐酸曲美他嗪20mg、微晶纤维素50mg、甘露醇17.6mg、低取代羟丙基纤维素(L-HPC) 15mg、羧甲基淀粉钠(CMS-Na) 15mg、二氧化硅1.2mg、硬脂酸镁1.2mg,包衣液处方为每120ml 95%乙醇中含甲基丙烯酸共聚物A型(EudragitL100) 6.72g、乙基纤维素2.88g、聚乙二醇60000.96g,包衣增重8.0%。根据盐酸曲美他嗪脉冲片的脆碎度和释放曲线,确定脉冲片硬度6-8kg。以药物释放时滞为筛选指标,确定包衣工艺。制备的三批盐酸曲美他嗪脉冲片的含量分别是100.24%、99.16%、99.59%；单个最大杂质分别为0.04%、0.04%、0.05%,总杂质分别为0.11%、0.10%、0.12%；三批样品体外释放曲线批内和批间重现性均良好。表明处方工艺合理,批内一致性、批间重现性好,说明适合工业化大生产。3质量研究及稳定性考察对盐酸曲美他嗪脉冲片进行质量研究。采用HPLC法检测含量和有关物质,方法学研究表明,含量测定方法主成分在浓度为60.864μg/ml～142.016μg/ml的范围内线性良好,回归方程为y=25.65x-2.6196 r=0.9999；平均回收率99.55%,RSD为0.59%；采用2种不同的色谱柱,流动相缓冲盐pH值2.8～3.2,含量测定方法的耐用性良好。有关物质检查方法专属性好,中间精密度试验良好；采用三种不同的色谱柱,流动相B比例不同,耐用性良好。建立UV-VIS测定释放度方法,进行了方法学验证,盐酸曲美他嗪脉冲片在水、O.lmol/1 HCl、pH6.8磷酸盐缓冲液中线性、回收率、精密度均良好。方法学验证结果表明,建立的分析方法专属性好,灵敏度高,线性关系良好,溶液稳定,分离度符合要求,适合用于盐酸曲美他嗪脉冲片的质量研究。通过释药模型拟合研究制剂的体外释药机理,通过显微镜观察包衣膜的外观形态,结果释放前包衣膜完整光滑,在pH6.8的PBS中释放后,包衣膜中Eudragit L100在pH6.8PBS中溶解后衣膜表面产生大量孔隙,水分通过孔隙进入片芯引起崩解剂膨胀,包衣膜破裂,释放出活性成分。释药机理研究表明,盐酸曲美他嗪脉冲片的体外释放符合Ritger-Peppas及Difusion/Relaxation模型,两种模型拟合结果一致,释药机制以扩散机理为主。盐酸曲美他嗪脉冲片在高温、强光、高湿条件下放置10天进行影响因素试验,加速试验(40℃±2℃,RH75%±5%)、长期试验(25℃±2℃、RH60%±10%)等稳定性研究表明。各项质量指标均无明显变化,说明稳定性良好。4 Beagle犬体内的药物动力学研究建立了-HPLC法测定犬血浆中盐酸曲美他嗪血药浓度,Beagle犬单剂量口服盐酸曲美他嗪脉冲片和市售盐酸曲美他嗪片,分别测定血药浓度。采用2周期随机交叉试验进了体内药物动力学研究,周期间隔时间一周。用药动学软件PKSolver V2.0进行数据拟合,根据AIC最小原则,判定两制剂在犬体内的药动学符合一室模型。盐酸曲美他嗪脉冲片相对普通片生物利用度为96.95%；两制剂生物等效；非参数检验表明两制剂Tmax有显著差异。盐酸曲美他嗪脉冲片体内时滞约为4 h,达到择时释放目的,且与市售盐酸曲美他嗪片生物等效。用Wagner-Nelson法计算盐酸曲美他嗪脉冲片体内吸收百分数Fa,将Fa与对应时间的体外累积释放度(Ft)进行线性回归,结果表明：y=1.0232x+1.1021,r=0.9996。体外释放与体内吸收有良好的相关性。结论：根据时辰药理学和时辰治疗学原理,以盐酸曲美他嗪为模型药物,成功制备膜控型脉冲片。处方工艺合理,批内一致性、批间重现性好,适合工业化大生产；加速试验及长期试验表明所制脉冲片稳定性良好；药动学研究表明,脉冲片体内外相关性良好,释放时滞一致,达到脉冲释药目的,根据疾病需要择时释药,同时减少夜间血药浓度,降低药物的耐药性和毒副作用,起到预防和治疗心绞痛的目的,具有较高的理论意义和临床应用价值。