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目的：目前胃癌术后腹膜种植转移的发生率高达50％，是影响胃癌治疗后无瘤生存率的最直接原因之一。早期检测并有效处理腹膜微小种植转移是提高生存率的关键所在。本研究比较逆转录多聚酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)法和转录逆转录协调反应（transcription-reverse transcription concerted reaction,TRC）法检测胃癌腹腔内微量游离癌细胞时间以及对新肿瘤标志物四型再生基因(regenerating gene type IV,RegⅣ)和常用标志物癌胚抗原(carcinoembryonic antigen，CEA)的敏感性比较检测，探讨能提供临床服务的实用方法及RegⅣ可作为胃癌腹膜转移的标志物的可能性。 方法：为检测出胃癌细胞，以胃癌腹水中采集的细胞株SNU-719体外培养细胞和10例胃癌患者手术中采集的腹腔冲洗液作为实验组。用急性早幼粒白血病细胞株 HL60培养细胞作为对照组。SNU-719和 HL60用含有10％小牛血清RPMI-1640培养液，37℃培养箱培养后使用于实验。以2007年在京都府立医科大学附属医院消化外科接受胃癌手术的患者10例做为临床检测标本的对象。开腹后用200ml生理盐水冲洗直肠膀胱陷凹采集后，以此作为腹腔内冲洗液用于实验。对实验组10例患者按常规要求，手术中采集腹腔冲洗液和病理标本，供病理检查。SNU-719和HL60在37℃培养箱培养成106-7/ml、腹腔冲洗液，分别离心，取沉淀细胞。加RNase free water提取了SNU-719和腹腔冲洗液中的总RNA，转换成cDNA，根据每次循环结合荧光测定法的Gene Amp5700序列探测系统，对已合成cDNA进行RT-PCR反应，快速定量检测RegⅣmRNA和CEA mRNA。用TRCR实时监测仪TRCRapid-160和相应试剂盒检测RegⅣmRNA和CEA mRNA，并记录各检查方法的检出时间。 结果：⑴RT-PCR法和TRC法检出时间比较。 RT-PCR法，从手术室采取腹腔内冲洗液至提取 RNA平均时间为40min，转换成 cDNA(RT)平均时间为60min，RT-PCR反应需要的平均时间为114min，从采集腹腔冲洗液至检出结果必要的总时间为214±15min。TRC法，采集腹腔冲洗液至提取RNA平均为40min，TRC反应平均33min，从采集腹腔内冲洗液到得出检测结果所必要的总时间为73±7min。TRC法与 RT-PCR法比较能在短时间内得到检测结果，统计学分析有显著性差异（P<0.01）。⑵胃癌腹水细胞株中RegⅣmRNA的检出。 RT-PCR法检测结果显示，含有不同比例胃癌腹水细胞株 SNU-719的mRNA浓度待测标本中，RegⅣmRNA/β－actin mRNA比值增高，SNU-719的mRNA浓度达100％时比值最高，0％时其比值最小。TRC法中，含有不同比例胃癌腹水细胞株SNU-719的mRNA浓度的待测标本中，Reg IV mRNA/PBGD mRNA比值也增高，RNA浓度达100％时最高。⑶胃癌腹水细胞株中CEA mRNA的检出。RT-PCR法检测结果显示，含有不同比例胃癌腹水细胞株SNU-719的mRNA浓度待测标本中，CEA mRNA/β－actin mRNA比值增高，SNU-719的mRNA浓度达100％时比值最高，0％时其比值最小。TRC法中，含有不同比例胃癌腹水细胞株SNU-719的mRNA浓度的待测标本中，CEA mRNA/PBGD mRNA比值也增高，RNA浓度达100％时最高。⑷腹腔冲洗液中RegⅣmRNA和CEA mRNA检测。10例胃癌患者组织病理学检查，随着胃癌胃壁浸润程度加深以及腹腔冲洗液细胞检查阳性，用RT-PCR和TRC方法检测RegⅣ mRNA检出率呈上升趋势，其中检出率最高的是 PCY（＋）病例。对于腹腔冲洗液的CEA mRNA的检测得到结果与检测RegⅣmRNA结果几乎相同的表现。而且，两种方法之间有高度相关性（Y=0.931X+0.605,γ＝0.996，P<0.00001）。 结论：①TRC方法与RT-PCR方法比较具有快速简便特点，手术中可以了解腹膜转移信息。②新的肿瘤标志物RegIVmRNA对胃癌腹水细胞株SUN-719和胃癌病例均有高度敏感性。③RegⅣ mRNA与CEA mRNA比较同样具有敏感性，在RNA浓度0.01％～100％范围内，用RT-PCR法和TRC法检测得到几乎相同的结果，两种检测方法敏感度比较无显著性差异。④随胃癌浸润深度加深，RegⅣ mRNA与CEA mRNA检出率增高，对腹膜微量癌细胞检测有一定意义。