胃溃疡作为常见的消化性溃疡疾病之一,正困扰着世界各地许多人。目前,治疗胃溃疡一般依赖于合成类药物,但往往带来多种毒副作用。因此,寻求更安全有效的抗胃溃疡替代品已备受关注。目前,猴头菇（Hericium erinaceus）子实体及其水提物均被证实具有胃黏膜辅助保护功效,但是尚无足够证据表明是猴头菇子实体中哪种成分发挥作用。多糖是天然产物中非常重要的生物活性成分之一,同时多糖是猴头菇子实体中的重要成分,因此本研究以猴头菇子实体多糖为研究对象,试图解析对胃黏膜损伤有辅助保护作用的多糖组分。猴头菇子实体多糖经热水浸提法得到,并采用乙醇分级沉淀方法对其进行纯化。借助甲基化和1D/2D NMR手段解析其分离纯化所得组分的结构特征。采用乙醇致胃黏膜损伤、幽门结扎致急性胃溃疡和醋酸致慢性胃溃疡模型评估猴头菇子实体多糖是否对胃黏膜具有辅助保护功能。通过双氧水致人胃上皮细胞（Human gastric mucosal epithelial cell line,GES-1）损伤模型从纯化多糖组分中筛选出具有相对较强细胞保护作用的特征多糖组分。主要研究内容和结论如下:1.对猴头菇子实体多糖进行分离纯化。通过热水浸提与乙醇沉淀的方法提取得到猴头菇子实体多糖,再采用乙醇分级沉淀法对其进一步分离纯化,测定猴头菇子实体多糖及其纯化组分的基本理化特征。结果显示:猴头菇子实体多糖为含有少量蛋白质的多糖,主要由岩藻糖（Fuc）、半乳糖（Gal）和葡萄糖（Glc）组成,在表观形态上表现出光滑的片状结构。经乙醇分级沉淀方法成功从HERP中得到5种均一性良好的多糖组分（RP-50、RP-60、RP-70、RP-80和RP-S）。它们的得率分别为23.9%、23.4%、16.7%、8.6%和6.8%,多糖含量分别为93.5%、91.5%、93.1%、81.3%和71.8%。2.表征了RP-50的一级结构。主要采用甲基化和1D/2D NMR手段对RP-50的结构特征进行研究。结果显示:RP-50的平均相对分子量为20.7 k Da,主要由Fuc、Gal和Glc三种单糖组成,质量百分比例为15.6∶55.2∶10.7。RP-50在在SEM扫描观察中表现为光滑的片状结构。RP-50主要由α-Fucp-（1→（18.0%）、→6）-β-Glcp-（1→（11.6%）、→6）-α-Galp-（1→（45.6%）和→2,6）-α-Galp-（1→（17.8%）等4种糖残基组成。其主链由→6）-α-Galp-（1→组成,在→6）-α-Galp-(1→的O-2位置连接着α-Fucp-（1→。它还可能含有→6）-β-Glcp-（1→6）-β-Glcp-(1→结构片段。3.表征了RP-60的一级结构。主要利用甲基化和1D/2D NMR手段对RP-60进行结构表征。结果显示:RP-60平均相对分子量为17.4 k Da,主要由Fuc、Gal和Glc三种单糖组成,质量百分比例为8.8∶34.6∶35.9。RP-60在SEM扫描观察中表现为片状、块状和光滑的结构。RP-60由Fucp-(1→（8.9%）、Glcp-(1→（13.8%）、Galp-（1→（3.7%）、→3）-Galp-（1→（6.6%）、→6）-Glcp-（1→（32.0%）、→6）-Galp-（1→（17.2%）、→3,6）-Glcp-（1→（9.7%）、→2,6）-Galp-（1→（7.8%）等糖残基组成。其主链由→6）-β-Glcp-（1→和→6）-α-Galp-（1→组成,在→6）-β-Glcp-(1→的O-3位置连接着β-Glcp-（1→,在→6）-α-Galp-(1→的O-2位置连接着α-Fucp-(1→。它还可能含有β-Galp-（1→3,6）-β-Glcp-（1→或→3）-Galp-（1→3,6）-β-Glcp-(1→结构片段。4.表征了RP-70的一级结构。主要利用甲基化和1D/2D NMR技术确定RP-60的结构特征。结果显示:RP-70平均相对分子量为9.0 k Da,主要由Gal（8.3%）和Glc（51.1%）组成。SEM观察显示其表观形态表现为片状、块状、棒状和球状结构。RP-70主要由β-Glcp-（1→（15.0%）、→3）-β-Glcp-（1→（13.8%）、→6）-β-Glcp-（1→（45.9%）和→3,6）-β-Glcp-（1→（16.3%）组成。其主链由→6）-β-Glcp-(1→组成,支链由β-Glcp-（1→3）-β-Glcp-(1→构成且分支点位于O-3位置。5.表征了RP-80的一级结构。结合甲基化和1D/2D NMR分析等方法研究RP-80的结构特征。结果显示:RP-80的平均相对分子量为4.4 k Da,且主要由Glc组成。SEM观察显示其在表观形态上表现为片状和棒状结构。RP-80由β-Glcp-（1→（16.6%）、→3）-β-Glcp-（1→（11.9%）、→6）-β-Glcp-（1→（57.2%）和→3,6）-β-Glcp-（1→（14.3%）等4种糖残基组成。其主链由→6）-β-Glcp-(1→组成,支链由β-Glcp-（1→3）-β-Glcp-(1→构成且分支点位于O-3位置。6.表征了RP-S的一级结构。结合甲基化和1D/2D NMR等方法研究RP-S的一级结构特征。结果显示:RP-S的平均相对分子量为2.1 k Da,且主要由Glc组成。SEM观察显示其在表观形态上表现为块状结构且聚集在一起。RP-S主要由β-Glcp-（1→（24.4%）、→6）-β-Glcp-（1→（51.5%）和→3,6）-β-Glcp-（1→（19.9%）三种糖残基组成,且含有少量→3）-β-Glcp-（1→（4.1%）残基。其主链由→6）-β-Glcp-(1→组成,支链由β-Glcp-(1→组成且分支点位于O-3位置。7.评估了猴头菇子实体多糖对急性胃黏膜损伤和急性胃溃疡的改善作用。结合乙醇致大鼠急性胃黏膜损伤和幽门结扎致大鼠急性胃溃疡模型研究猴头菇子实体水提多糖的胃黏膜辅助保护功能。结果显示:在乙醇致大鼠急性胃黏膜损伤模型中,猴头菇子实体多糖预处理能够降低大鼠胃黏膜损伤指数,且HERP的作用强于HECP。在幽门结扎致大鼠急性胃溃疡模型中,猴头菇子实体多糖预处理能够减小大鼠的胃溃疡指数,减轻胃组织宏观形态和组织病理形态改变,降低胃液体积、胃蛋白酶活性和胃酸排出量,提高胃液p H值和黏液含量。而且,能够降低大鼠血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）、胃泌素水平和胃组织髓过氧化物酶（MPO）活力;提高大鼠胃组织中超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）的活力;增加大鼠胃组织中一氧化氮（NO）、前列腺素E2（PGE2）、表皮生长因子（EGF）含量,降低组胺（HIS）释放。此外,在浓度为200 mg/kg bw剂量时,HERP减轻幽门结扎致急性胃溃疡的作用强于HECP。猴头菇子实体多糖对幽门结扎致急性胃溃疡的减轻作用机制可能是调控胃分泌、减轻炎症响应、改善抗氧化状态和调节胃黏膜防御因子与攻击因子的释放。8.研究了猴头菇子实体多糖对慢性胃溃疡愈合的促进作用。采用醋酸致大鼠慢性胃溃疡模型探索猴头菇子实体多糖对慢性胃溃疡愈合的促进作用。结果显示:猴头菇子实体多糖处理能够降低胃溃疡大鼠胃组织溃疡圈大小与胃组织腺体结构丢失。在浓度为400 mg/kg bw剂量时,HERP在促进大鼠慢性胃溃疡愈合作用上强于HECP。同时,猴头菇子实体多糖处理能够提高大鼠血清过氧化氢酶（CAT）活力与胃组织SOD活力,降低胃组织白细胞介素-6（IL-6）、TNF-α、丙二醛（MDA）的水平与MPO活力,增加胃组织中NO、PGE2、EGF、血管内皮生长因子（VEGF）和碱性成纤维细胞生长因子（b FGF）等防御因子的释放。此外,免疫组化分析表明猴头菇子实体多糖处理可增加胃组织中磷酸肌醇3激酶（PI3K）和蛋白激酶B（AKT）的免疫表达。上述结果表明,猴头菇子实体多糖对醋酸致大鼠慢性胃溃疡愈合的促进作用可能与降低炎症响应、提高抗氧化能力、促进胃黏膜防御因子释放和增加PI3K与AKT的表达有关。9.筛选出了猴头菇子实体水提多糖纯化组分中对GES-1细胞损伤具有较强抑制作用的特征多糖。利用双氧水致GES-1细胞氧化损伤模型评估HERP及其纯化多糖组分（RP-50、RP-60、RP-70、RP-80和RP-S）对GES-1细胞的保护作用。结果显示:HERP及其纯化多糖组分（RP-50、RP-60、RP-70、RP-80和RP-S）能够提升双氧水致GES-1细胞的生存能力,其中RP-S表现出比其他组分相对更强的作用。因此后续选择RP-S进行实验,进行相关生化指标测定。RP-S预处理能够降低双氧水致GES-1细胞的乳酸脱氢酶（LDH）活力和细胞凋亡、降低GES-1细胞上清液中MDA和活性氧（ROS）水平,升高SOD与GPx活力。这些结果表明RP-S预处理能够通过提升GES-1细胞的抗氧化能力。