中药有效成分KBA抑制HEL和DAMI白血病细胞增殖、诱导凋亡及增加化疗药敏的研究

来源 :浙江中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:diaolan
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目的:观察从人参总皂苷分离出的有效成分KBA(暂命名)对人红系HEL和巨核系DAMI白血病细胞的增殖抑制、诱导凋亡及与化疗药物的协同作用,证实KBA组分抗白血病的作用。  方法:从人参总皂苷进一步分离出有效成分KBA,采用琼脂半固体集落培养增殖试验、化疗药物敏感性试验、液体培养MTT试验、流式细胞术Annexin V分析、琼脂糖凝胶电泳分析DNA降解梯形条带、凋亡细胞形态学观察等方法,观察不同浓度的KBA对白血病细胞的增殖抑制、诱导凋亡及与化疗药物的协同作用。  结果:(1)KBA能够直接地抑制 HEL、DAMI白血病细胞增殖,集落生成数明显减少(P分别<0.01),小剂量10mg/L起效,随着剂量加大,作用更为明显,呈剂量依赖关系。KBA10~100mg/L对HEL、DAMI白血病集落生成的抑制率分别达到25.8~92.3%、21.5~89.9%。  (2)液体培养KBA作用细胞72h后MTT检测,KBA10~100mg/L能够直接地抑制白血病细胞增殖,吸光度明显下降,低于对照组(P分别<0.01),对HEL、DAMI白血病细胞的抑制率分别达到28.5~51.1%、58.2~75.9%。  (3)KBA与化疗药高三尖杉酯碱(Hom)、阿糖胞苷(Ara-c)联合应用可以增加HEL、DAMI白血病细胞化疗药对的敏感性,集落生成数明显减少(P分别<0.01)。小剂量10mg/L即可起作用,随着剂量加大,作用更为明显,KBA20mg/L增强化疗药物Hom、Ara-c的杀伤作用2.70~4.52倍。  (4)KBA10~150mg/L作用于48h,能够诱导HEL、DAMI白血病细胞凋亡,Annexin V阳性细胞率分别为5.43~43.50%、15.30~51.65%,明显高于对照组(P分别<0.05或<0.01)。  (5)形态学特征出现凋亡小体,琼脂糖凝胶电泳分析出现凋亡典型的DNA降解梯形条带。  结论:KBA能够抑制HEL和DAMI白血病细胞增殖,并呈剂量依赖关系。低浓度10mg/L就能够增加白血病细胞对化疗药物的敏感性,并诱导 HEL和DAMI 白血病细胞凋亡的作用明显。提示KBA是抗白血病的有效提取成分,为其进一步深入研究和临床应用奠定基础。
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