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目的 大剂量化疗或放疗联合造血干细胞移植在中晚期恶性肿瘤尤其是实体瘤治疗中的应用越来越广泛,尽管随着技术的逐步完善,造血干细胞移植的死亡率逐渐下降,但移植后早期骨髓造血和免疫功能的重建状况仍是威胁患者生命的重要因素之一。本实验以BALB/c小鼠外周血造血干细胞移植为模型,选择IL-2为移植后的处理因素,旨在观察IL-2能否促进移植后早期骨髓造血和免疫功能的重建。材料与方法 供体BALB/c小鼠于实验前5天给予环磷酰胺200mg/kg腹腔注射一次,于实验前3天、前2天、前1天和实验当天给予惠尔血250μg/kg皮下注射各一次,最后一次惠尔血注射2~3小时后取血。血样经Ficoll-hypaque液(密度为1.090)分离,获得半个核细胞(MNC)悬液。另取BALB/c 40只,于实验当天给予致死量(8Gy)60Coγ射线全身辐照,随机分为四组,每组10只,其中一组小鼠作为单纯辐照组,不予移植,另三组小鼠于辐照后4~6小时内,自尾静脉给予回输单个核细胞悬液,每只小鼠接受0.5×106MNCs。移植后处理:A组(单纯辐照组)无特殊处理,B组(惠尔血组)给予惠尔血200μg/kg皮下注射,C组(IL-2组)给予IL-2 2.5×106IU/kg腹腔注射,D组(惠尔血+IL-2组)给予惠尔血200μg/kg皮下注射及IL-2 2.5×106IU/kg腹腔注射。移植后每周检测血常规一次, 南京医科大学硕士学位论文 第四周起,隔周检测CD矿/CDS”细胞,实验结束时,取骨髓 标本,制成超薄切片,透射电镜下观察骨髓造血微环境,进 行骨髓粒细胞-巨噬细胞集落形成单位(CFU七M)的检测, 取脾脏标本,检测脾脏克隆形成单位(CFUS)和脾脏质量。 结果 卜)单纯辐照组 10只小鼠辐照后 2周全部死亡,移 植,J、鼠存活率明显高于单纯辐照组,但各移植组之间未见明 显差异。门)辐照后,小鼠外周血白细胞总数明显减少, 于实验7叶 天降至最低点,然后逐步回升,但恢复决慢有所 差异,惠尔血组及惠尔血和IL上联用组白细胞恢复快于IL上 组,惠尔血组及惠尔血和IL上联用组之间未见显著差异。门) 移植后,ILZ育够促进CD4“/CDS”兰月 比值的恢复。(4) 电镜结果显示,正常小鼠骨髓中内皮细胞、网状细胞结构完 整,与造血千细胞接触紧密。单纯辐照组小鼠骨髓中内皮细 胞、网状细胞内织网肿胀,线粒体有空泡样改变或坏死,核 膜欠完整,胞浆内脂滴增多,内皮细胞、网状细胞与造血干 细胞连接松散。移植组小鼠骨髓中内皮细胞、网状细胞的损 伤较单纯辐照组轻,与造血干细胞接触也相对较好。b)造 血千细胞移植后,惠尔血、IL上均可促进小鼠骨髓 CFU心M 的恢复。IL七效果弱于惠尔血。K)造血干细胞移植后,惠 尔血、IL习均可增加脾脏质量和CFUS的形成,两者联用脾 脏质量增加和CFUS的形成尤为明显,但两者在增加脾脏质 量上无统计学差异。结论 惠尔血、IL上均可促进小鼠外周 血造血干细月移植后白细胞数、CD4“/CDS”、CFU.GM、CFU-S 和脾脏质量的恢复,有保护和改善骨髓造血微环境的作用, 惠尔血可能作用于造血干细胞表面的GCSF受体,主要侧重 于早期造血干细胞,IL上则可作用于不同阶段的细胞,不仅 对造血干细胞有作用,对外周血中的粒-单/巨噬细胞和淋巴细 胞都有促进分化的作用。