白花败酱(Patrinia villosa Juss)多糖的研究

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白花败酱(Patrinia villosa Juss)属败酱科多年生草本植物,营养丰富,具有很高的食用和药用价值。本文以白花败酱为原料,利用多糖分离纯化技术、仪器分析技术对白花败酱多糖的提取、分离纯化、纯度鉴定、理化性质、抗氧化活性等方面进行了较为系统的研究,得到如下结论:(1)通过单因素实验及正交实验对白花败酱水溶性多糖提取工艺条件进行优化,发现浸提温度对白花败酱中水溶性多糖得率有显著性影响。白花败酱水溶性多糖热水提取的最佳工艺参数为料液比1:30,温度100℃,浸提时间6h。在此工艺条件下水溶性粗多糖得率为14.03%。(2)采用碱液提取白花败酱水溶性多糖提取后残渣中的碱溶性多糖,通过单因素实验及正交实验对其提取工艺条件进行优化,发现碱浓度对白花败酱碱溶性粗多糖得率有极显著性影响。白花败酱碱溶性多糖的最佳提取条件为NaOH浓度0.9mol/L,提取时间5h,料液比1:35。在此工艺条件下碱溶性多糖的得率为8.53%。(3)白花败酱水溶性多糖经热水浸提,Sevag法脱蛋白,透析,乙醇沉淀,DEAE—纤维素及Sephadex G-100分离纯化,得到两种多糖PVPS-Ⅰ-H-Fr和PVPS-Ⅰ-L-Fr。经高效液相色谱仪分析证明PVPS-Ⅰ-H-Fr和PVPS-Ⅰ-L-Fr为纯品,其得率分别为0.227%和0.634%(干重)。经定性化学反应鉴定表明PVPS-Ⅰ-H-Fr、PVPS-Ⅰ-L-Fr不含蛋白质、核酸,为非淀粉类纯粹多糖,其重均分子量分别为153461.7和26085.6。PVPS-Ⅰ-L-Fr完全酸水解后经气相色谱分析确定其至少由L-鼠李糖、L-阿拉伯糖、D-甘露糖、D-葡萄糖、D-半乳糖五种单糖组成。(4)对多糖PVPS-Ⅰ-L-Fr的体外抗氧化能力进行了初探。分别采用FRAP法测定其总抗氧化能力,普鲁士兰法测定其还原能力,并测定其对ABTS~+·自由基和羟基自由基的清除效果。结果显示PVPS-Ⅰ-L-Fr的总抗氧化活性相当于Vc总抗氧化活性的4.74%:随着PVPS-Ⅰ-L-Fr浓度的增大,其还原能力也依次增强;浓度为0.375mg/mL的PVPS-Ⅰ-L-Fr对ABTS~+·自由基的清除能力相当于11.73mg/kg的trolox;当PVPS-Ⅰ-L-Fr溶液浓度为6mg/mL时,其对羟基自由基的清除率为59.77%,表明PVPS-Ⅰ-L-Fr具有一定的清除自由基能力。本实验对白花败酱多糖的分析研究能够为该多糖的进一步开发利用提供一定的理论依据,为白花败酱保健食品和药物的开发提供了良好基础。
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