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研究背景:宫颈癌是妇科生殖道肿瘤中最常见的恶性肿瘤。人体免疫系统能够监视、清除外来及内生有害成分,因此免疫系统功能缺失可能导致宫颈癌在体内发生、发展。HLA-G作为人类白细胞抗原系统中HLA I类分子的成员,在免疫功能中主要发挥免疫耐受的作用。HLA-G主要在胎盘等涉及到母胎作用的地方表达,在生理状态下还可能出现在胸腺、胰腺、角膜等组织以及部分活化的单核细胞等细胞中,而病理状态下,如肿瘤、病毒感染、自身免疫性疾病等时HLA-G出现表达异常。研究证实HLA-G在人类多种恶性肿瘤组织中有不同程度的异常表达,文献报道在宫颈癌组织中的表达差异较大。HLA-G在卵巢癌、肺癌、乳腺癌等恶性肿瘤的发生发展过程中发挥了相应功能,我们推测其在宫颈癌的发生发展中也起到了较为重要的作用。研究目的:1、使用Meta分析探讨HLA-G在宫颈癌中的作用;2、以半定量方法检测宫颈癌组织中HLA-G的表达,了解宫颈癌中HLA-G的分布,探讨HLA-G的蛋白表达与宫颈癌临床病理特征的联系:3、建立稳定表达HLA-G1的宫颈癌C-33A和CaSki细胞株,初步探讨HLA-G在宫颈癌肿瘤生物学特性及免疫耐受中的作用及机制。研究方法:1、在常用数据库中检索HLA-G在宫颈癌中表达的文献,分析HLA-G分子与宫颈癌临床病理参数之间的关系;2、收集经过临床证实的早期宫颈癌组织及癌旁组织,检测HLA-G各亚型mRNA及HLA-G蛋白的表达;3、收集临床病理资料,分析HLA-G与临床病理特征之间的关系;4、包装HLA-G1慢病毒,转染宫颈癌细胞株,获得稳定表达HLA-G1的宫颈癌细胞中;5、检测HLA-G1对宫颈癌细胞株迁移能力以及在NK-92MI细胞对宫颈癌细胞株的细胞毒作用中的影响,蛋白芯片检测宫颈癌细胞株MAPK信号通路常见组成蛋白。结果:1、Meta分析显示HLA-G蛋白在宫颈癌中表达显著高于CIN组织和正常宫颈组织,在FIGO分期Ⅲ/Ⅳ期组HLA-G表达显著高于Ⅰ/Ⅱ期组;2、早期宫颈癌组织和癌旁组织HLA-G各亚型mRNA表达程度不一,其中HLA-G6在两种组织中均无表达,癌旁组织中还同时存在HLA-G2和HLA-G5的表达缺失,癌组织和癌旁组织各亚型mRNA之间表达差异无统计学意义(P>0. 05)。HLA-G蛋白在宫颈癌组织中表达率为75.6% (31/41),在癌旁组织中无表达(0/12);3、HLA-G蛋白表达程度分别与宫颈癌FIGO分期(Ⅰvs.Ⅱ)(P<0. 01)和组织分化(低分化vs.中高分化)(P<0.05)相关,提示HLA-G可能参与了宫颈癌的疾病进展;4、经过慢病毒转染及筛选,成功建立了能够稳定表达HLA-G1的宫颈癌细胞株C-33A 和 CaSki:5、Transwell迁移实验结果显示HLA-G1对宫颈癌细胞迁移不产生影响,而在NK-92MI细胞对宫颈癌的杀伤中起到了抑制作用;6、蛋白芯片检测CaSki和CaSki-HLA-G1细胞株MAKP信号通路17种蛋白,结果显示未发现两者间存在差异。结论:1、HLA-G分子可能促进宫颈癌临床分期的进展;2、HLA-G在宫颈癌中的异常表达提示其在宫颈癌发生发展过程中起到了一定作用;3、HLA-G对宫颈癌迁移没有单独影响,而对免疫杀伤过程中NK细胞的杀伤作用有抑制作用,HLA-G对宫颈癌细胞的作用可能不是通过MAPK信号通路作用的。