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白斑综合症(white spot syndrome,WSS)是当前全球对虾养殖业所面临的危害性最大影响范围最广的病害之一,并成为目前制约养虾业发展的主要瓶颈之一。正因如此,世界各国的水产病害专家均对WSSV投入了极大关注。根据实际需要,本研究致力于开发抗WSSV的口服蛋黄抗体制剂,以寻找一种防治WSS简单有效的新方法。 首先,本实验用改进的简单有效的WSSV差速离心法对病虾虾鳃组织进行病毒提纯,并与目前广泛采用的超速离心法作了比较后,得出差速离心完全可以替代超速离心的结论;然后用提纯的病毒以不同剂量加福氏佐剂对蛋鸡免疫后,间接ELISA方法观察抗体的生成规律,确认合适的WSSV免疫程序为首免100ug,以后每隔两周加强免疫一次,并且剂量加大一倍,经过三次免疫,可以在卵黄中检测到高效价的抗体,且持续时间超过两个月。接下来我们对卵黄抗体的分离纯化及适合大规模制备的工艺进行了研究,经水稀释及盐析两个简单的步骤得到了纯度为80%左右的抗体溶液,在进一步的Sephadex G-25及DEAE纤维素柱层析纯化后,得到了纯度高达97.3%的卵黄抗体;然后通过不同方式的卵黄抗体喷雾干燥实验,证实了直接喷雾抗体损失不大,且在添加了保护剂后还能进一步的保持抗体活性,认定喷雾干燥是简单易行的大规模卵黄抗体制备方法。最后我们用喷雾制备的卵黄粉添加到对虾基础日粮中,深入研究了不同剂量口服卵黄抗体对WSSV人工攻毒条件下对螯虾的保护效果,结论是20%的卵黄添加量能够在一定程度上延缓螯虾的死亡时间,而40%的卵黄添加量则能够使螯虾的死亡率从100%降至30%左右,且预饲组与非预饲组差别不明显。 本实验通过一系列的步骤对WSSV卵黄抗体的生成、制备工艺及应用效果的探索研究,从而为WSSV蛋黄抗体的开发应用提供了关键的技术平台和理论依据。目前国内尚无同类产品的开发,经检索国际专利亦无本项目设计的工艺及适应症,预测该项目具有较大的市场开发潜能。