纳米酶催化—表面增强拉曼散射光谱法检测葡萄糖、克仑特罗和三磷酸腺苷

来源 :广西师范大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:nonomad
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自从2007年发现Fe3O4磁性纳米颗粒是一种过氧化物模拟酶后,纳米酶就作为一类新兴的模拟酶发展迅速,其出色的催化活性和生物相容性吸引了广大研究者的关注,但是它们的很多催化性能还有待进一步开发。表面增强拉曼散射(SERS)是一种简便、灵敏的分子光谱分析方法,同时能提供分子结构信息。将SERS与纳米酶催化相结合,可以进一步提高方法的灵敏度。在该论文中,我们拟制备一系列的纳米酶,构建纳米酶催化体系,研究其催化变化规律,并对纳米酶进行改性,探讨其改性后催化增强机理;再结合选择性好的生物酶催化反应、免疫反应和适配体反应调控纳米酶催化活性,构建简便、灵敏、选择性好的纳米酶催化-SERS检测平台。在光波辐照的条件下,以柠檬酸三钠还原AgNO3制备了稳定性较好的SERS活性较高的橙红色纳米银胶体(AgNP)。在pH 7.0的磷酸盐(PBS)缓冲溶液中,葡萄糖氧化酶可以特异性催化葡萄糖生成H2O2,在催化剂和SERS基底AgNP存在时,H2O2可以氧化3,3ˊ,5,5ˊ-四甲基联苯胺(TMB)生成蓝色氧化产物(TMBox),并使得AgNP聚集,在1606cm-1处产生较强的SERS信号。该SERS信号与葡萄糖浓度呈线性关系,据此,建立了一种检测葡萄糖的葡萄糖氧化酶耦合纳米银催化SERS定量分析新方法。实验用SEM和红外光谱验证了TMBox的生成,采用吸收光谱证明了TMBox可以将AgNP聚集。对比了不同SERS探针及不同形貌纳米银检测葡萄糖的灵敏度,发现TMB-AgNP体系最灵敏,最后将该体系应用于血清中葡萄糖的检测,效果较好。以果糖为前驱物,采用水热法制备了N、S、Ag、N/S、N/Au、N/Ag元素掺杂的高催化活性碳点(CD),并研究了它们对柠檬酸三钠-HAuCl4纳米金反应的催化能力。结果表明,CD可以强烈催化柠檬酸三钠-HAuCl4反应生成红色的金纳米粒子,在维多利亚蓝B(VBB)存在的条件下,体系出现较强的SERS信号;其中,CDN/Ag的催化能力最强。将碳点催化反应与免疫反应相结合,建立了一种简单、灵敏的免疫调CDN/Ag催化活性SERS新方法检测克仑特罗(Clen)。采用TEM、SEM、能谱、粒度分析及电位分析等技术对碳点及体系进行了表征。研究了不同元素掺杂及不同掺杂比例的碳点的催化变化规律,然后推导了掺杂后碳点可能的催化增强机理。最后,将该方法应用于食品中Clen的检测。基于适配体介导的共价有机框架(COFs)纳米催化放大信号策略,开发了一个新型的表面增强拉曼散射/共振瑞利散射(SERS/RRS)耦合双模分析法用于检测三磷酸腺苷(ATP)含量。采用溶剂热合成法制备了COFs材料,基于COFs表面具有丰富的氨基,在COFs中引入了Au元素,制备了一种金掺杂的COFs材料(AuCOFs),考察了其对AgNO3-柠檬酸三钠-柠檬酸反应的催化性能。将AuCOFs催化反应与适配体反应相结合,大大提高了体系的选择性。基于催化产物具有强SERS及RRS效应,且它们的强度都与纳米粒子的浓度呈正比例关系,可以将RRS与SERS耦合建立SERS/RRS双模分析法,大大提高了体系的灵敏度。采用TEM、XRD、能谱及红外光谱对COFs材料进行了表征,从它们的结果可以清晰看到COFs材料的结构,也证明了Au/Ag的成功掺杂。研究了掺杂前后COFs的催化变化规律及其掺杂Au/Ag后催化增强机理。最后,将该方法应用于药品中ATP的检测,效果较好。本论文以金属纳米粒子、碳点和COFs作为纳米酶,通过纳米酶催化耦合生物酶催化反应体系、免疫/适配体调控纳米酶催化反应体系的建立,为提高分析方法的选择性及灵敏度提供了参考。掺杂前后纳米酶催化活性的变化规律的探讨为纳米酶的催化机理的研究提供了数据支撑,具有一定的实际意义。纳米酶催化-SERS分析平台的建立为痕量有机小分子的检测扩大了应用范围。
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