论文部分内容阅读
在我国的恶性肿瘤中,肺癌占据最高的发病率和死亡率,在已经诊断为的肺癌的患者中,大约有80%-85%为非小细胞肺癌(NSCLC),而这些NSCLC患者在确诊时,约70%已发展成为晚期非小细胞肺癌,丧失了手术机会。所以,化疗成为晚期非小细胞肺癌的主要治疗手段。由于吉西他滨的适应征广,副作用比较小,美国FDA将其批准为NSCLC的一线化疗药物。即使如此,应用吉西他滨治疗晚期NSCLC患者的有效率也仅为30%-40%,究其原因,化疗药物耐药性成为治疗效果不佳的主要原因。很多研究表明,导致肿瘤细胞耐药的主要原因是由于某些蛋白的高表达。因此,若能利用蛋白质组学技术筛选出吉西他滨耐药相关蛋白,构建出蛋白指纹图谱模型,就可以预测NSCLC患者应用吉西他滨化疗方案的疗效,从而有助于为NSCLC患者制定个体化化疗方案,提高化疗疗效。目的:本研究目的是应用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)分析吉西他滨化疗有效组与无效组NSCLC患者血清蛋白图谱差异,探索耐药血清蛋白预测因子。方法:1.病例收集收集2012年3月-2013年9月在山西医科大学第一附属医院肿瘤科就诊,将行吉西他滨化疗并经影像学检查至少有一个可测量病灶的患者20例。具体纳入条件如下:(1)经病理学或细胞学证实为非小细胞肺癌但不能手术或其他原因不宜手术的Ⅲ期或Ⅳ期病人及手术后复发转移者;(2)PS评分小于2分;(3)预期生存时间大于3个月;(4)年龄小于等于75岁。排除条件如下:(1)年老体衰或恶液质者;(2)心肝肾功能严重障碍者;(3)骨髓功能不佳白细胞在3×109/L以下,血小板在80×109/L(直接计数)以下者;(4)有并发病和感染发热出血倾向等。2.血清标本采集(1)于吉西他滨化疗前,清晨空腹静脉采血3m1,离心分离血清置于EDTA抗凝试管,-80℃冻存。(2)化疗2周期后行化疗效果评价,按照RECIST实体瘤近期疗效评价标准确定分组:化疗有效组(CR+PR+SD)和无效组(PD)。3.所有样本用弱阳离子微珠进行分离,在基质辅助激光解析离子化-时间飞行质谱仪上进行血清蛋白质谱检测,所获得的质谱数据通过ClinProToolTM(CPT)软件进行统计学分析,在用CPT软件正式分析前先对样品原始质谱图进行处理,包括基线消减、校正和归一化。结果:经两组血清蛋白质谱图比较,发现有3个血清蛋白质表达水平在两组血清中有统计学差异。该3个血清蛋白质谱峰为5263.98、3096.38及16634.06(m/z)。3个差异蛋白峰均在无效组血清中为高表达。结论:特定的血清蛋白差异可能与吉西他滨治疗NSCLC患者出现耐药相关。这些差异蛋白的特性及耐药机制有待进一步研究。