透明质酸酶对眼眶成纤维细胞的作用研究

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目的: 观察透明质酸酶对体外培养的正常人的球后成纤维细胞生长的抑制作用以及其对细胞分泌的透明质酸的影响,为临床上透明质酸酶治疗甲状腺相关眼病提供实验室依据。 方法: 1.组织块法培养人眶成纤维细胞,观察细胞的生长状况及特性,HE染色了解其形态学特点,免疫组化染色鉴定细胞来源。 2.应用浓度分别为5、10、25、50、100μg/ml的透明质酸酶,分别作用于培养的成纤维细胞,在24、48、72小时观察成纤维细胞形态的变化,应用MTT比色法、放射免疫分析法观察不同浓度透明质酸酶对眶成纤维细胞增殖及分泌透明质酸的作用。 结果: 1.体外培养的眶成纤维细胞生长良好,传代稳定,细胞呈梭形或星形,免疫组化鉴定波形蛋白阳性。 2.不同浓度(5~100μg/ml)的透明质酸酶作用于眶成纤维细胞24、48、72小时,MTT法所测量的OD值虽然低于正常对照组,但经SPSS11.5软件包进行统计分析,差异无显著性(P>0.05)。 3.放射免疫法测量细胞培养上清液中透明质酸的量,不同浓度的透明质酸酶(5~100μ/ml)作用于眶成纤维细胞24、48、72小时后,培养上清液中HA含量明显减少,与对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。并且随着
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