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可见光的过量暴露可以引起视网膜细胞损伤及年龄相关性黄斑变性,其病理机制与视网膜所处的高氧和高多不饱和脂肪酸环境相关,使得视网膜对光照的敏感性增加,进而引发光氧化和炎症反应,最终造成视网膜色素上皮(RPE)细胞和感光细胞的损伤。多酚具有抗氧化、抗炎和抗凋亡等活性,可以抑制视网膜细胞中ROS的生成,是常见的抗氧化营养补充剂。本研究基于可见光诱导的青紫蓝兔视网膜损伤模型,通过灌胃给药的方式评价沙棘黄酮提取物对视网膜的保护效果。进一步,研究5种多酚(槲皮素、矢车菊-3-葡萄糖苷、原儿茶酸、阿魏酸和绿原酸)在同等剂量条件下对视网膜光损伤的预防作用,并立足于氧化应激、炎症反应、凋亡通路和血管生成等方面对作用机理进行初步探讨。利用类视色素二聚体A2E积累的RPE细胞蓝光损伤模型,筛选对RPE细胞光氧化损伤具有保护作用的多酚,进一步研究槲皮素和矢车菊-3-葡萄糖苷对细胞内A2E光氧化和光裂解途径的抑制作用和相关机制。主要研究结果如下:1.确定可见光诱导的青紫蓝兔视网膜损伤模型条件为:18000lux可见光照射2h,7天后测定视网膜各项指标。对视网膜组织进行病理学和生化指标检测发现,光照后动物ERG b波振幅和视网膜外核层(ONL)厚度显著下降,视网膜发生氧化应激和脂质过氧化反应,炎症因子、血管生成因子和促凋亡蛋白水平升高。沙棘黄酮提取物可缓解光照后视网膜结构和功能的变化,从抗氧化和抗炎等途径抑制视网膜光氧化损伤。2.果蔬中富含的两种主要非花色苷多酚—槲皮素和绿原酸在体内通过抑制氧化应激和炎症反应,调节凋亡相关蛋白和血管生成因子,保护光诱导的视网膜退行性病变。其作用机制为槲皮素通过增加HO-1的表达和抑制NF-κB活性起到保护作用,而绿原酸只通过增加HO-1的表达起保护作用。3.矢车菊-3-葡萄糖苷及其酚酸代谢产物—原儿茶酸和阿魏酸摄入保护感光细胞结构和功能,且矢车菊-3-葡萄糖苷和阿魏酸对暗视ERG和组织学完整性的保护效果优于原儿茶酸。矢车菊-3-葡萄糖苷和阿魏酸在降低视网膜氧化应激指标(3-nitrotyrosine和8-OHdG)水平方面效果优于原儿茶酸,进一步研究表明矢车菊-3-葡萄糖苷和阿魏酸可能激活调控Nrf2/HO-1通路保护视网膜细胞;矢车菊-3-葡萄糖苷、原儿茶酸和阿魏酸均能降低光氧化诱导的炎症因子表达(MCP-1、IL-8和IL-1β),抑制炎症反应,此外阿魏酸还可抑制NF-κB活性进而起到抗炎效果;矢车菊-3-葡萄糖苷及其代谢产物在抑制线粒体凋亡通路的激活方面具有重要作用;矢车菊-3-葡萄糖苷和原儿茶酸抑制光诱导的视网膜中VEGF和HIF-1α含量的升高。4、槲皮素和矢车菊-3-葡萄糖苷提高光损伤RPE细胞存活率,对其机制进行深入研究发现,可通过清除细胞内ROS,从而抑制ROS与A2E碳碳双键反应导致的光氧化和光裂解反应,进而抑制RPE细胞二羰基化合物丙酮醛生成,抑制蛋白羰基化引起的RAGE mRNA表达上调,从而起到保护作用。此外,槲皮素和矢车菊-3-葡萄糖苷可抑制光氧化导致的感光细胞外节脂质过氧化产物HNE生成。