肺癌是一种发病率、死亡率极高的恶性肿瘤。有资料显示，2000年以来我国的肺癌发病率呈显著上升趋势，目前我国每年肺癌死亡人数可达60万，已成为严重危害人民健康的疾病。在过去的几年中，已经证实肺癌的发生、发展是多基因改变的结果。肺癌中特殊基因的表达异常在不同的细胞功能中发挥重要作用，但是其发生和演进的具体机制尚不完全清楚。　　 REIC(Reduced Expression in Immortalized Cells)是通过差异分析系统发现的，因为与对应正常细胞相比其在永生化细胞中表达降低而得名。初步研究表明，恶性肿瘤中REIC通过参与调节肿瘤细胞的增殖和凋亡平衡而在肿瘤发生和演进过程中发挥抑制作用。因此，探讨REIC基因在肺癌组织中的表达及其临床意义，可以推动肺癌病因学和治疗学发展。我们开展本研究，为了更好的了解REIC在肺癌发生和演进过程中的作用，进而促进对肺癌的诊断和治疗。　　 材料与方法：　　 1、培养肺癌细胞，利用RT-PCR和实时PCR检测各种细胞系中的REICmRNA水平，ELISA实验检测各种肺癌细胞REIC蛋白的血清分泌水平。　　 2、MTT比色实验检测REIC重组蛋白对肺癌细胞和血管内皮细胞的生长和增殖情况的影响，筛选REIC重组蛋白的最佳作用浓度；应用流式细胞术(Flow CytoMetry，FCM)检测REIC重组蛋白作用后SQ-5和KJ细胞周期变化及细胞凋亡情况；REIC重组蛋白作用后，应用Cldu/Idu双重标记法检测SQ-5细胞的复制时相。　　 3、提取肺癌细胞中的基因组DNA，进行启动子甲基化检测。并在培养液中加入5-乙酰唑胺-2-脱氧胞苷酸进行甲基化干扰。同时利用实时PCR检测干扰前后细胞的REICmRNA水平。　　 4、应用RT-PCR、实时PCR和Western-blot检测18例肺癌新鲜标本REIC mRNA水平和蛋白表达：构建组织芯片后免疫组织化学检测肺癌中REIC蛋白表达，比较其表达与肺癌临床病理生物学行为及预后的关系。　　 结果：　　 1、肺癌细胞系中REIC表达及分泌水平　　 H460、H446、MS-1、AOI、LC-IF、SQ-5、KJ及PC-14等八种肺癌细胞中REIC mRNA表达水平和分泌水平很低。　　 2、重组REIC蛋白对肺癌细胞表型和血管内皮细胞表型的影响　　 加入不同浓度REIC重组蛋白之后，SQ-5和KJ两种肺癌细胞的增殖率在低浓度范围内(＜100ng/mL)有一定程度升高，高浓度范围内（＞100ng/mL）有降低趋势(P＜0.05)。对ECV304和HUVEC两种血管内皮细胞具有同样的作用（P＜0.01）。SQ-5和KJ两种肺癌细胞在50ng/mL和100ng/mL的REIC重组蛋白作用下，G2期比例增加，S期比例下降（P＜0.05）；细胞早期凋亡水平提高，线粒体膜电位检测提示细胞线粒体受损（P＜0.05）。　　 3、提取肺癌细胞中的基因组DNA，进行启动子甲基化检测　　 甲基化实验显示，H460、H446、MS-1、AOI、LC-IF、SQ-5、KJ及PC-14等八种肺癌细胞中启动子存在甲基化。5-乙酰唑胺-2-脱氧胞苷酸处理H460、H446、SQ-5及KJ后，以上细胞启动子甲基化消失，REIC mRNA水平较处理前升高(P＜0.05)。　　 4、肺癌组织中REIC表达及与临床病理特征的关系　　 与癌旁组织相比，癌组织中REIC mRNA和蛋白表达水平均减少（P＜0.05）。REIC蛋白表达于肺癌细胞浆中，REIC表达与患者的性别、年龄、分化、淋巴侵袭、静脉侵袭、淋巴结转移、病理分期及预后无关（P＞0.05），而与Caspase-3表达呈正相关（P＜0.05）。　　 结论：　　 1、重组REIC蛋白对血管内皮细胞具有增殖促进作用，对肺鳞癌和腺癌细胞同时具有增殖促进作用和诱导凋亡作用。　　 2、REIC启动子区甲基化是其表达降低的分子生物学基础。　　 3、肺癌组织中REIC蛋白和mRNA的组织含量低于癌旁组织。　　 4、REIC蛋白可能成为判断肿瘤发生的生物学标记。