DNA复制是细胞周期、细胞发育和癌症形成过程中的关键事件。生物体为了确保遗传物质传递的忠实性，必需对其DNA复制进行严格的控制以保证遗传物质在每个细胞分裂周期只精确地复制一次。真核生物基因组数量非常庞大，但是它们的DNA可以从分布在各条染色体上的多个复制原点起始复制，因而整个基因组可以在较短时间内完成复制。所以DNA复制起始是真核生物复制调控的重要环节，顺式作用元件和反式作用因子之间的相互作用控制着DNA复制的有效起始。本论文研究运用一种筛选酵母DNA复制起始蛋白的新方法，从65834个EMS诱变的酵母菌株中，得到57个质粒高丢失候选菌株。通过用p1ARS和p8ARSs进行二级筛选，得到26个质粒高丢失菌株，其中有15个复制起始突变株和11个有丝分裂突变株。经过进一步用已知起始基因的三级筛选，已经发现了6个已知基因突变株和7个未知基因突变株。通过酵母基因组文库克隆到1个可能的复制起始基因：CTF3。其他未知基因突变株的筛选还在进行。目前已知CTF3参与染色体分离过程，我们的结果也证明：ctf3全基因敲除菌株确实在染色体分离方面存在缺陷。对Ctf3p的结构及其同系物的分析发现，此蛋白有两个结构域，染色体分离这个功能可能只与其中一个结构域有关，因此推测另外一个结构域与DNA复制起始有关。为了研究CTF3基因在DNA复制起始过程中的功能，本文对突变菌株的ctf3基因进行了序列测定。结果发现：它们在ctf3基因的第一个结构域内部发生了无义突变，分别在染色体的880808和880993处产生了一个终止密码子。为了确定这两个结构域能否独立发挥功能，而且它们的功能是否与推测一致，我们分别构建了它们的表达载体，以进行功能研究。