阴道毛滴虫粘附蛋白基因ap33的克隆及其融合蛋白的表达

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阴道毛滴虫(Trichomonas vaginalis)为寄生于男女泌尿生殖道的鞭毛虫.本文采用PCR方法从T.vaginalis临床分离菌株中扩增全长的基因,T-A克隆测序后构建原核表达系统pET32a(+)-ap33-BL21DE3,用不同浓度的IPTG诱导AP33融合蛋白表达,其产物将作为T.vaginalis基因工程疫苗及诊断试剂盒的抗原.结论本次实验所分离的临床分离株为甲硝唑敏感株.甲硝唑在体外具有明显的杀灭阴道毛滴虫作用,0.98μg/ml~250μg/ml浓度的药物对滴虫均有抑制和杀灭作用.本实验在国内首次成功地从T.vaginalis临床分离株中克隆ap33基因,阳性克隆测序分析结果表明与已报道的T.vaginalis ap33基因有很高的同源性;构建了pET32a(+)-ap33-BL21DE3高效表达系统,建立短时获取大量AP33融合蛋白的方法.为今后AP33单克隆抗体的制备,及进一步开发快速诊断试剂盒奠定基础.
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