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目前,海洋污染日趋加剧,而其中的石油污染尤为严重,不仅威胁海洋生物的生存、生长和繁殖,降低海洋的使用价值,破坏海岸设施,还会影响该海区的水文气象条件和降低海洋的自净能力。治理海洋石油污染的主要方法有物理法、化学法和生物法。而其中生物治理凭借其费用低且不产生二次污染等优势表现出巨大的潜力,由此石油降解菌成为国内外学者的研究热点。本文从2013年9月份开始,以石油降解菌为研究对象,选取威海小石岛水样进行预实验,确定了切实可行的试验方案。于2014年3月至2015年7月分批多次从不同站位取得海水水样进行试验。一方面水样用于石油降解菌的分离筛选工作,同时对筛得的细菌进行16S rDNA序列测定,最终确定其种属类别;另一方面对部分水样进行高通量测序,对石油降解菌的多样性做进一步深入的研究。主要工作如下:(1)选取全国13个不同油污染的地区水样进行研究,地点包括:大连的大连湾和金石滩、威海小石岛和金沙滩、青岛团岛和薛家岛码头、烟台、天津港、秦皇岛、上海、厦门公务码头、深圳东角头。试验以柴油作为培养基的唯一碳源,筛选出具有柴油降解能力的菌株,已做序列测定的有19株,鉴定结果为:芽孢杆菌属(Bacillus)6株,假单胞菌属(Pseudomonas)3株,鞘脂菌属(Sphingobium) 2株,弧菌属(Vibrio)2株,土芽孢杆菌属(Geobacillus)1株,短芽孢杆菌属(Brevibacillus)1株,短杆菌属(Brevibacterium)1株,亚硫酸盐杆菌属(Sulfitobacter)1株,副球菌属(Paracoccus)1株,不动杆菌属(Acinetobacter)1株;其中4株为新种,有待于进一步的研究。并测得18℃、28℃和30℃下细菌的生长曲线和对柴油的降解率,可以看出:所有菌株生长趋势均为“细菌型曲线生长,分为调整期、对数生长期、稳定期和衰退期。在28℃和30℃下细菌的调整期、对数生长期均比18℃下的时间短,细菌数量多。三种温度下细菌对柴油降解率均在30%以上,不同菌株在不同温度下对柴油的降解率略有差异。(2)同时本试验对大连、石岛、深圳地区添加1%(V/V)柴油前后的水样进行高通量测序,可以看出:添加柴油前后的水样中共有OTU含量仅为10%左右,且细菌的总量、种类都发生了显著差异。大连水样添加柴油前约有221属,添加柴油后减少为173个属;石岛水样添加柴油前约有321属,添加柴油之后减少为196属,深圳水样在添加柴油前有241属,添加柴油后变为203属。其中深圳水样中菌落结构变化最少,大连次之,石岛水样中菌群差异最为显著,这和采样水域石油污染程度不同一致。假螺菌属(Pseudospirillum)在三个地区均相对丰富,添加柴油之后出现不同程度的减少;科尔韦尔氏菌属(Colwellia)为石岛和深圳水样的优势种,在大连地区却未发现,添加柴油之后明显减少,几乎不能适应新环境;食烷菌属(Alcanivorax)和单胞菌属(Alteromonas)在添加柴油之后的三组水样中显著增加,体现了这两种菌对柴油的偏好性。总体来说,柴油对海洋生态环境菌群的结构和数量均有较大影响。