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白藜芦醇苷具有抗氧化、抑菌、抗癌、抑制血小板聚集等活性,在医药、保健、美容方面具有广阔的应用前景。目前白藜芦醇苷的提取以传统浸提法和回流法为主,提取效率较低。虎杖是我国一种常用的中草药,白藜芦醇苷在其中含量较高,本论文以虎杖作为对象,研究对比了先进的超声辅助提取法与普通浸提法的优劣,优选出白藜芦醇苷提取工艺参数,为合理综合利用虎杖资源提供理论依据。
本文主要研究内容和结果如下:
1.研究了白藜芦醇苷含量的测定方法及其评价,包括HPLC法、紫外分光光度法、一阶导数光谱法。结果表明:高效液相色谱法用于白藜芦醇苷含量的测定,精密度好,准确性高,但操作较复杂。一阶导数光谱法、紫外分光光度法可用于有紫外吸收混合化合物含量的测定,操作简便,但准确性差。
2.研究了温度、光照、pH、氧化剂对白藜芦醇苷稳定性的影响。结果表明:白藜芦醇苷对热、光照,尤其是直射太阳光的稳定性较差;而对pH表现较为稳定;白藜芦醇苷稳定性受氧化剂影响较大。
3.以传统浸提法为对照,系统研究了超声辅助提取白藜芦醇苷工艺参数,表明超声辅助提取法优于浸提法,可以缩短提取时间和提高白藜芦醇苷得率。通过单因素试验考察了超声频率和功率、溶剂种类、粒径、料液比、提取时间、提取次数等参数对提取效果的影响,并通过响应面分析法优化了工艺参数:超声波频率为25kHz、功率250W、提取温度65℃、提取时间23min、料液比1:76、乙醇浓度60%。该工艺条件下,白藜芦醇苷得率为(11.982±0.210)mg/g,比浸提处理120min,得率提高了25.86%。
4.通过虎杖中白藜芦醇苷的超声提取试验,对lnc与lnt以及lnc与lnp的关系进行验证。结果表明:在一定的时间范围,lnc与Int呈良好的线性关系;lnc与lnp基本上呈线性关系。
5.超声波强化提取机理研究
(1)电镜扫描结果表明:超声空化泡破裂形成的微射流对虎杖粉末表面的微观结构产生侵蚀和破碎作用,使其从致密变得疏松,增大了传质速率,强化提取效果。
(2)碘释放法证实了超声波处理存在声化学效应。一定时间内碘释放量随超声波处理时间延长而增加,声化学效应增强。声化学效应受超声功率及频率的影响,表现出功率越高,频率越低,声化学效应越强的趋势。
(3)研究了声化学效应对白藜芦醇苷稳定性的影响。不同浓度的白藜芦醇苷标准品溶液在不同频率、功率下进行超声处理,经T检验表明,试样与对照间白藜芦醇苷含量差异不显著,说明超声处理过程中产生的过氧化氢对白藜芦醇苷稳定性影响不大。