缺血性心脏病是威胁人类健康的主要心血管疾病，而心肌梗死又常常是其严重的、致命性的结局。溶栓药物的不断开发、心血管介入技术以及冠状动脉旁路移植术的长足进步为心肌梗死的再灌注治疗提供了多种有效的方法，降低了心肌梗死的死亡率，改善了病人的预后。然而，在再灌注治疗的过程中，再灌注本身也会带来心肌损伤，即再灌注损伤。这也是制约接受再灌注治疗的心肌梗死病人预后进一步改善的重要因素。因此，如何防治心肌缺血/再灌注损伤至今仍是心血管研究领域的重要课题。 缺血预处理(preconditioning)由Murry及其同事于1986年首先提出，是一种对抗缺血、缺血/再灌注损伤的内源性保护形式，可以降低心脏缺血、缺血/再灌注心律失常的发生率和严重程度，减少缺血/再灌注所致心肌细胞凋亡，减小心肌梗死的面积，促进心脏功能的恢复。缺血后处理(postconditioning)是近年来才提出的另外一种内源性心脏保护形式，是指在心脏较长时间缺血后再灌注时，首先给予心脏数次短时间的再灌注/缺血循环，然后才给予心脏充分的再灌注。目前研究显示，缺血后处理与缺血预处理对心肌缺血/再灌注具有相似的保护作用。 尽管缺血预处理、缺血后处理对于正常心脏的缺血/再灌注损伤具有较强的保护作用。然而，缺血预处理、缺血后处理的保护机制与Ang-(1-7)的保护机制显然不尽相同。血管紧张素转化酶抑制剂或血管紧张素Ⅱ受体阻断剂能够增强缺血预处理的心肌保护作用或降低缺血预处理保护作用产生的阈值。缺血预处理或缺血后处理与Ang-(1-7)联合应用是否会产生相加或协同效应?这一问题也值得研究。 我们通过制作大鼠腹主动脉缩窄致心肌肥厚模型，并在此基础上利用Langendorff装置建立心肌肥厚大鼠离体心脏缺血/再灌注损伤模型，分别给予缺血预处理、缺血后处理、Ang-(1-7)单独或联合处理，探讨缺血预处理、缺血后处理和Ang-(1-7)对肥厚心肌缺血/再灌注损伤的影响及其相关机制，同时探讨缺血预处理或缺血后处理与Ang-(1-7)联合应用对肥厚心肌缺血/再灌注损伤的影响。 本研究包括四个部分：第一部分：缺血预处理对心肌肥厚大鼠离体心脏缺血/再灌注损伤的影响及PI3K/Akt/GSK-3β信号通路的作用。 第二部分：缺血后处理对心肌肥厚大鼠离体心脏缺血/再灌注损伤的影响及PI3K/Akt/GSK-3β信号通路的作用。 第三部分：血管紧张素-(1-7)对心肌肥厚大鼠离体心脏缺血/再灌注损伤的影响及其机制。 第四部分：缺血预处理或缺血后处理与血管紧张素-(1-7)联合应用对肥厚心肌缺血/再灌注损伤的影响。 第一部分缺血预处理对心肌肥厚大鼠离体心脏缺血/再灌注损伤的影响及PI3K/Akt/GSK-3β信号通路的作用目的探讨缺血预处理对心肌肥厚大鼠离体心脏缺血/再灌注损伤的影响及PI3K/Akt/GSK-3β信号通路的作用。 方法通过手术缩窄腹主动脉，制作大鼠心肌肥厚模型，然后利用Langendorff装置进行心肌肥厚大鼠离体心脏缺血30min/再灌注60min。 结果缺血/再灌注30min后，各组离体心脏CF、HR、LVSP均有明显降低(P＜0.01)，LDH、CK的释放明显增多(P＜0.01)。与缺血/再灌注对照组相比，缺血预处理组心脏CF、LVSP、HR均有显著提高(P＜0.01)，CK、LDH释放减少(P＜0.01)，心肌梗死范围减小(44.2％±1.1％vs21.5％±1.1％，P＜0.01)，心肌Akt、GSK-3β磷酸化水平增高(P＜0.01，P＜0.05)。Wortmannin能够抑制缺血预处理所致的Akt、GSK-3β磷酸化，但只能部分消除缺血预处理的心脏保护效应。 结论缺血预处理能够减轻心肌肥厚大鼠离体心脏缺血/再灌注损伤，PI3K/Akt/GSK-3β信号通路参与介导缺血预处理对离体缺血/再灌注心肌肥厚大鼠心脏的保护作用。 第二部分缺血后处理对心肌肥厚大鼠离体心脏缺血/再灌注损伤的影响及PI3K/Akt/GSK-3β信号通路的作用目的探讨缺血后处理对心肌肥厚大鼠离体心脏缺血/再灌注损伤的影响及PI3K/Akt/GSK-3β信号通路的作用。 方法通过手术缩窄腹主动脉，制作大鼠心肌肥厚模型，然后利用Langendorff装置进行心肌肥厚大鼠离体心脏缺血30min/再灌注60min。观察离体缺血/再灌注心脏LVSP、HR、CF的变化和CK、LDH的释放，并在离体心脏灌流结束时用TTC染色法测定心肌梗死范围，利用Western-blot技术检测心肌Akt、GSK-3β的蛋白表达和磷酸化状态。 结果与缺血/再灌注对照组相比，缺血后处理组心脏LVSP、CF、HR显著提高(P＜0.01)，冠脉循环流出液中CK、LDH释放减少(P＜0.01)，心肌梗死范围减小(45.2％±1.1％vs22.3％±0.9％，P＜0.01)，心肌组织中磷酸化Akt(Ser473)、磷酸化GSK-3β(Ser9)水平增高(P＜0.01)，PI3K抑制剂Wortmannin能够抑制缺血后处理所致的磷酸化Akt(Ser473)、磷酸化GSK-3β(Ser9)水平升高，但只能部分消除缺血后处理的心脏保护效应。 结论缺血后处理能够减轻心肌肥厚大鼠离体心脏缺血/再灌注损伤，PI3K/Akt/GSK-3β信号通路参与介导缺血后处理对离体缺血/再灌注心肌肥厚大鼠心脏的保护作用。 第三部分血管紧张素-(1-7)对心肌肥厚大鼠离体心脏缺血/再灌注损伤的影响及其机制目的 探讨血管紧张素-(1-7)对心肌肥厚大鼠离体心脏缺血/再灌注损伤的影响及其机制 方法通过手术缩窄腹主动脉，制作大鼠心肌肥厚模型，然后利用Langendorff装置进行心肌肥厚大鼠离体心脏缺血30min/再灌注60min。、Mas受体拮抗剂A779处理对照组(A779)、缓激肽B2受体拮抗剂Hoe140处理对照组(Hoe)。观察离体缺血/再灌注心脏LVSP、HR、CF的变化和CK、LDH的释放，并在离体心脏灌流结束时用TTC染色法测定心肌梗死范围。 结果与缺血/再灌注对照组相比，血管紧张素-(1-7)处理组心脏LVSP、CF显著提高(P＜0.01)，冠脉循环流出液中CK、LDH释放减少(P＜0.01)，心肌梗死范围减小(46.2％±2.7％vs28.3±1.4％，P＜0.01)。血管紧张素-(1-7)受体拮抗剂A779、缓激肽B2受体拮抗剂Hoe140能够消除血管紧张素-(1-7)的这种心脏保护作用。 结论血管紧张素-(1-7)能够减轻心肌肥厚大鼠离体心脏缺血/再灌注损伤，其作用通过其特异性受体介导，并与缓激肽的作用密切相关。 第四部分缺血预处理或缺血后处理与血管紧张素-(1-7)合用对心肌肥厚大鼠离体心脏缺血/再灌注损伤的影响目的探讨缺血预处理或缺血后处理与血管紧张素-(1-7)合用对心肌肥厚大鼠离体心脏缺血/再灌注损伤的影响 方法通过手术缩窄腹主动脉，制作大鼠心肌肥厚模型，然后利用Langendorff装置进行心肌肥厚大鼠离体心脏缺血30min/再灌注60min。观察离体缺血/再灌注心脏LVSP、HR、CF的变化和CK、LDH的释放，并在离体心脏灌流结束时用TTC染色法测定心肌梗死范围。 结果与缺血/再灌注对照组比较，血管紧张素-(1-7)组、缺血预处理组、缺血后处理组离体心脏的CF、HR、LVSP显著提高(P＜0.01)，LDH、CK的释放减少，心肌梗死范围减小(45.6％±1.2％vs27.4％±1.3％，24.3％±0.8％，25.7％±1.1％，P＜0.01)。缺血预处理或缺血后处理与血管紧张素-(1-7)联合应用，有进一步促进CF恢复的趋势，但无统计学差异(P＞0.05)。缺血预处理与血管紧张素-(1-7)联合应用略使离体心脏左室收缩压进一步升高，有进一步促进离体心脏收缩功能恢复的趋势(P＜0.05)。缺血后处理与血管紧张素-(1-7)联合应用有进一步改善离体心脏收缩功能的趋势，但无统计学差异(P＞0.05)。缺血预处理与血管紧张素-(1-7)联合应用使CK的释放进一步减少(P＜0.01)，缺血后处理与血管紧张素-(1-7)联合应用使LDH、CK的释放都进一步减少(P＜0.05，P＜0.01)。与缺血预处理组或缺血后处理组相比，缺血预处理或缺血后处理与血管紧张素-(1-7)联合应用都能使心肌梗死范围进一步减小(24.3％±0.8％vs19.9％±1.5％，P＜0.01，25.7％±1.1％vs20.5％±1.9％，P＜0.01)。 结论缺血预处理或缺血后处理与血管紧张素-(1-7)联合应用有进一步减轻心肌肥厚大鼠离体心脏缺血/再灌注损伤的趋势。