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螺旋藻被誉为"21世纪最理想的食品"。随着保健品的生产和开发,螺旋藻的安全品质越来越受到人们的关注。近年来,我国部分品牌的螺旋藻保健品中发生了砷(As)含量超标事件,开展螺旋藻砷污染控制的研究已非常紧迫。以往这方面的研究大多集中在藻粉中总As含量的检测和螺旋藻As污染源的分析。有关磷(P)浓度如何影响螺旋藻吸附、吸收和转化砷酸盐As(V)、亚砷酸盐As(Ⅲ)的研究仍鲜有报道。本试验以钝顶螺旋藻为研究对象,首先用不同浓度As(Ⅴ)、As(Ⅲ)处理螺旋藻7 d,研究藻体对As的吸附和吸收特性;然后降低培养液中P浓度,研究不同P浓度对螺旋藻生长的影响;在藻体生长不受影响的情况下,研究不同P浓度对螺旋藻As(Ⅴ)、As(Ⅲ)吸附、吸收及胞内As形态的影响。主要研究结果如下:1.不同P浓度对螺旋藻生长的影响采用实验室内培养,设置系列P浓度(1/200P正~P正,P正为正常P供应时培养基中P的浓度88.9mg·L-1)处理,研究不同P浓度对螺旋藻生物量、藻胆蛋白、叶绿素含量的影响。结果表明,与P正相比,1/10、1/25、1/50P正对螺旋藻的生长没有影响;当P浓度降低时1/100P正时,藻体藻胆蛋白显著降低,叶绿素含量增加;当P继续降低至1/200P正时,螺旋藻的生物量、藻胆蛋白、叶绿素含量降低,生长受到显著影响。2.不同浓度As(Ⅴ)、As(Ⅲ)对螺旋藻生长、As富集的影响分别用不同浓度 As(V)(50、100、150、200、250、300 μg·L-1)、As(Ⅲ)(50、100、200、300 μg·L-1)处理螺旋藻,比较不同As处理对螺旋藻生长和As吸附、吸收特性的影响。研究结果表明,与无As处理的对照组相比,不同浓度As(Ⅴ)对螺旋藻的生物量几乎无影响,As(Ⅲ)处理的藻体生物量有增加的趋势,但变化不显著。螺旋藻As吸附量、吸收量和总砷含量均随着培养液中As处理浓度的升高显著增加。在相同As处理浓度下,As(Ⅲ)处理的藻体As吸收量和总砷含量均比As(V)处理的藻体高,而As吸附量相差不大。50、100 μg·L-1 As(Ⅴ)处理的螺旋藻几乎不吸收As,As(Ⅲ)处理的藻体As吸收量分别为0.242、0.300 mg·kg-1。因此,在相同As浓度处理时,螺旋藻对As(Ⅲ)的富集能力更强。此外,当培养液中As(Ⅴ)浓度达到150 μg·L-1时,藻体富集的As含量为1.006 mg·kg-1,超过了我国保健品中As的限量值1.0 mg·kg-1。As(Ⅲ)处理浓度为 200 μg·L-1、300 μg·L-1,藻体总砷含量为 1.471 mg·kg-1、2.285 mg kg-1,严重超过标准限量。但大部分的As被吸附在细胞表面,因此可以通过PBS洗脱明显降低藻体的总砷含量。此外,As(Ⅴ)处理时螺旋藻胞内只有As(Ⅴ)一种As形态,而As(Ⅲ)处理的藻体胞内同时存在As(Ⅲ)和As(Ⅴ),但以后者为主要形态。3.不同P浓度对螺旋藻吸附、吸收和转化As(V)、As(Ⅲ)的影响设置在不影响螺旋藻正常生长的P浓度(1/50P正~P正),分别用As(Ⅴ)(300 μg·L-1)、As(Ⅲ)(200、300 μg·L-1)处理螺旋藻,研究比较不同P浓度对螺旋藻As(Ⅴ)、As(Ⅲ)吸附、吸收和胞内As形态的差异。研究结果表明,正常P条件下,300 μg·L-1As(Ⅴ)、As(Ⅲ)处理的藻体吸收As含量分别为0.202、0.802 mg kg-1;当P浓度为1/25 P 正时,藻体As吸收量分别显著增加至1.369、2.181 mg kg-1;P降低至1/50P正藻体吸收的As含量继续增加至1.457、2.672 mg-kg-1,表明降低培养液中P的浓度会促进藻体对As的吸收,增加了螺旋藻As污染超标的风险。此外,用As(V)处理螺旋藻后,培养液中P浓度的降低还会促进螺旋藻胞内As的还原、甲基化和外排过程。当用As(Ⅲ)处理时,螺旋藻对As(Ⅲ)具有较强的氧化作用,降低培养液P浓度也促进了上述过程的发生。在300 μg· L-1As(Ⅴ)处理下,仅当P浓度降低至1/50P正时,螺旋藻胞内产生二甲基砷(DMA)。而当用300 μg·L-1As(Ⅲ)处理时,P浓度降低至1/25P正,螺旋藻胞内开始产生DMA,且DMA的含量随P浓度的降低(1/50P正)而增加。但是,As(Ⅴ)处理的螺旋藻甲基As比例较大(37.35%),而As(Ⅲ)处理的藻细胞内甲基As仅占5.58%。由此可以说明,当培养液中P浓度降低时,As(Ⅲ)处理下藻体胞内更容易产生甲基砷,但As(Ⅴ)处理下藻体甲基化能力更强。