啤酒糟蛋白的提取及酶解产物抗氧化活性的研究

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啤酒糟是啤酒工业的主要副产物,约占副产品总量的85%,它是生产啤酒的主要原料麦芽、大米和啤酒花经糖化、糊化、过滤之后残留的固体物质。啤酒糟中蛋白质含量丰富,经测定,啤酒糟中蛋白质含量为27.25%(以干基计),因此,啤酒糟是一种很好的蛋白质资源。啤酒糟中蛋白质由麦白蛋白,球蛋白,醇溶蛋白和谷蛋白组成,其中以醇溶蛋白和谷蛋白为主。以啤酒糟为原料制备活性多肽,是未来啤酒糟废弃物深加工的一个重要发展方向。   本文主要对超声强化提取啤酒糟蛋白、超声强化酶解啤酒糟蛋白以及酶解产物的抗氧化活性进行了研究,并用凝胶层析对啤酒糟蛋白的水解产物进行了初步的分离。   在超声强化提取啤酒糟蛋白的研究中,以啤酒糟蛋白的得率为指标,通过pH值、提取温度、提取时间、提取溶剂的种类等单因素实验,获得啤酒糟蛋白的得率与各单因素之间的关系;结合单因素实验,应用响应面(RSM)对啤酒糟蛋白的提取工艺进行优化,获得影响啤酒糟蛋白得率的二次多项式模型为:Y1=2.140+0.023X1+0.109X2+0.144X3+0.0852X4-0.041X12-0.061X1X2-0.059X1X3-0.002X1X4-0.087X22-0.041X2X3-0.026X2X4-0.092X32-0.003X3X4-0.068X42超声作用时间(X2)、液固比(X3)及pH值(X4)对蛋白质提取率的影响率显著,超声功率(X1)对蛋白质提取率的影响率不显著。应用响应面软件对回归方程进行分析,确定啤酒糟蛋白质的最佳提取条件为pH为9.7,超声作用时间64min,液固比为1:98,超声功率为75%。,蛋白质提取率为9.57%。   在超声强化酶解啤酒糟蛋白的研究中,以啤酒糟蛋白酶解液的抗氧化能力为指标,因风味蛋白酶的酶解液水解度及抗氧化能力最高,确定啤酒糟蛋白的水解酶为风味蛋白酶。通过对加酶量、酶解温度、酶解时间、酶解pH等单因素实验,得到啤酒糟蛋白酶解液的水解度、抗氧化能力与各单因素之间的关系;结合单因素实验,应用正交实验对啤酒糟蛋白的酶解工艺进行优化,确定啤酒糟蛋白酶解的最佳工艺条件为pH为6.5,超声酶解温度50℃,超声酶解时间5h,加酶量6%,在该酶解条件下,1mg/mL的风味蛋白酶酶解产物对DPPH·自由基清除率为47.21%,0.5mg/mL的该酶解产物对OH·自由基清除率达到86.73%。   通过SDS-PAGE法对啤酒糟蛋白酶解液的分子量分布进行分析,发现风味蛋白酶解产物中分子量小于6500的肽含量很高。凝胶层析实验结果也表明,风味蛋白酶解产物中组分2的含量占37.38%。此外,风味蛋白酶的水解产物在中性条件下的氮溶指数(NSI)达到89.05%,因而具有很好的溶解性。
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