人骨钙素的基因克隆及其载体构建

来源 :河北科技大学 | 被引量 : 3次 | 上传用户:deng15088151952
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Osteocalcin(骨钙素)是成骨细胞能够特异表达的少数几个蛋白之一,它具有激素的几个特征。例如,它作为前体分子合成,是细胞的特异分子,分泌后进入循环系统。在骨组织中骨钙素的含量比较丰富,它是由成熟的成骨细胞合成和分泌的,其中大部分沉积于骨基质中,大约五分之一释放入血,血清骨钙素含量与骨组织中骨钙素含量呈正相关性,因此血清骨钙素含量可以间接反映骨组织中骨钙素的合成状况。由于骨钙素主要在矿化形成期出现,所以它还被认为是成骨细胞向矿化发生期分化的标记之一。   本文运用基因工程技术对骨钙素基因进行克隆,并将其转入真核和原核表达载体,实验通过改造pcDNA3.1(+)-HA、pcDNA3.1(+)-HA-His和pGEX-4T-1质粒,使得骨钙素基因在表达载体中与特异性标签HA、His以及GST蛋白溶合系统相结合,得到以下成果:①构建成功真核表达载体pcDNA3.1(+)-HA-BGP;②成功构建具有HA和His双标签的真核表达载体pcDNA3.1(+)-HA-His-BGP;③具有GST溶合表达系统的原核表达载体pGEX-4T-1-BGP成功构建,为后续的蛋白表达实验和功能实验提供实验平台和基础材料。   最新研究发现骨钙索还具有调节糖代谢的功能,在调节糖代谢方面,它在牵制脂肪的同时还能提升胰岛索水平和胰岛素的吸收,骨钙素这种新的功能可能对糖尿病的治疗产生重要影响。
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