呋喃唑酮代谢物(AOZ)在日本鳗鲡体内的药物代谢动力学的研究及实物标准样品的制备

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1、本实验运用超高效液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)技术,研究药浴给药方式,呋喃唑酮在日本鳗鱼(Anguilla japonica)体内代谢物AOZ的药物代谢动力学及残留消除规律。结果表明:按200μg/L药浴24h,给药0.5h后,在鳗鲡肌肉、血浆和肝脏中均能检测到呋喃唑酮代谢物AOZ,并且达峰时间均为24h,其浓度分别为31.35μg/kg、98.29μg/L和323.37μg/kg。随后,代谢浓度开始下降,其中肌肉和血浆在给药84h后代谢速率趋于平缓,而肝脏在给药204h后代谢速率才逐渐趋于平缓。在给药276h后肌肉、血浆和肝脏中的AOZ浓度均被能检出,浓度分别是4.56μg/kg,11.71μg/L和42.01μg/kg。2、实验数据经DAS药代动力学分析软件分析,表明AOZ在日本鳗鲡体内的代谢过程可以用三室模型来描述。AOZ在日本鳗鲡肌肉,血液和肝脏中的主要药代动力学参数,分别为:分布半衰期(t1/2α)分别为34.608 h,26.257 h和122.538 h;消除半衰期(t1/2β)分别为292.143 h, 167.161 h和122.544 h;峰浓度(Cmax)为31.35μg/kg,98.29μg/ L和323.37μg/kg;峰时(tmax)均为24 h;药时曲线下面积(AUC)分别为4193.078μg/L·h ,12015.91μg/L·h和27516.65μg/L·h;清除率(CL)为0.048 L/h/kg, 0.017 L/h/kg和0.007 L/h/kg。3、本实验采用低温冷冻干燥技术,以日本鳗鲡肌肉组织为载体,研究并建立了呋喃唑酮代谢物AOZ实物标准品制备的方法。主要步骤如下:选择成鳗,体重在200g-300g之间,按200μg/L药浴给药。300 h后捞取活鳗,去除头、血、皮、骨以及内脏后,以1:4(阴性:阳性)的比例高速均质成肉泥。经冷冻干燥后,用正己烷除去脂肪制成冻干粉,抽真空后封口,辐射灭菌。对制成的实物标样进行检测,结果表明:阴性和阳性样品可以均匀混合且匀性良好;冻干粉浓度为4.818μg/kg,不受辐射影响。
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