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背景:人组织因子途径抑制物2(TFPI2)是一种含有库尼样结构域的丝氨酸蛋白酶抑制剂,它可以影响许多肿瘤细胞的侵袭和迁移。最近的研究表明TFPI2不仅可以影响细胞外基质(ECM)的完整性,还可以影响许多癌基因的表达,但TFPI2调节基因表达的分子机制还不是很明确。 目的:探讨在乳腺癌MDA-MB-231细胞中TFPI2对基质金属蛋白酶2(MMP2)mRNA表达的影响及其分子机制。 方法: (1)通过Western blot检测MDA-MB-231细胞内TFPI2的表达情况。 (2)细胞增殖(MTT)和细胞侵袭(Transwell)实验用来检测TFPI2对MDA-MB-231细胞功能的影响。 (3)Real time PCR分析MDA-MB-231细胞内基质金属蛋白酶(MMPs)的表达情况。 (4)免疫荧光检测TFPI2在MDA-MB-231细胞内的分布。 (5)荧光素酶报告基因和染色质共沉淀实验检测TFPI2如何调控活化蛋白-2(AP-2α)影响MMP2 mRNA的表达。 (6)免疫共沉淀实验检测TFPI2与AP-2α之间是否存在相互作用。 结果: (1)TFPI2的表达抑制MDA-MB-231细胞的增殖和侵袭。 (2)在MDA-MB-231细胞中,TFPI2的表达抑制MMP-2 mRNA的表达。 (3)TFPI-2分布在MDA-MB-231细胞浆及细胞核中。 (4)TFPI2影响AP-2α与MMP2启动子的结合能力,从而影响MMP2基因的转录。 (5)TFPI2与AP-2α存在相互作用。 结论:TFPI2影响MDA-MB-231细胞侵袭的机制之一是调控MMP2基因的转录。