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目的观察核黄素紫外光介导的角膜胶原交联(corneal collagen cross-linking,CXL)技术对小鼠真菌性角膜炎的治疗效果并探讨其作用机制。材料与方法随机选取角膜正常、8-10周龄的SPF级雄性C57BL/6J小鼠96只,体重27-30g,在小鼠左眼角膜中央用无菌手术刀片做十字划痕,深度达基质层,再用无菌注射针头在十字划痕上涂抹腐皮镰刀菌,建立腐皮镰刀菌型真菌性角膜炎模型,右侧眼为正常眼。模型成功后24h,按照随机数字表法将实验小鼠分为CXL治疗组与非治疗组,每组各48只,对CXL治疗组小鼠进行核黄素紫外光角膜胶原交联治疗,非治疗组小鼠不做任何处理。在模型成功24h(交联前0h)、36h、48h、72h、96h和120h对两组小鼠进行裂隙灯显微镜检查和眼前段数码照相,观察小鼠角膜溃疡大小、前房积脓以及炎症反应等临床表现并进行临床评分,评价CXL对小鼠真菌性角膜炎的治疗效果;于CXL治疗后12h(模型36h)取CXL治疗组与非治疗组小鼠角膜组织各6只,角膜剪碎、研磨,在土豆汤葡萄糖琼脂培养基中培养,观察真菌生长活力并进行真菌菌落记数,评价CXL对真菌生长活力的影响;在24h、36h、48h、72h、96h和120h时间点分别取CXL治疗组与非治疗组小鼠角膜组织各6只,进行基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinases,MMP-9)的活性测定,观察CXL治疗对MMP-9活性的影响。结果1、小鼠腐皮镰刀菌型真菌性角膜炎模型建立成功后24h,在裂隙灯显微镜下可见角膜灰白色浸润灶,部分可出现前房积脓、卫星灶,在激光扫描共聚焦显微镜下可见角膜病灶及其周围大量真菌菌丝和炎症细胞浸润。2、裂隙灯显微镜观察到CXL治疗组较非治疗组角膜溃疡病灶明显缩小,溃疡较浅,病程缩短,角膜穿孔率低,各个时间点临床评分明显低于非治疗组,差异有统计学意义(P<0.05)。3、角膜组织真菌培养,培养36h时培养基中开始有真菌菌落生长,培养48h时对CXL治疗组与非治疗组进行真菌菌落计数,两组真菌菌落计数无明显统计学差异(P>0.05)。4、酶活性测定发现CXL治疗组角膜组织中MMP-9活性明显低于非治疗组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论1、核黄素紫外光角膜胶原交联在治疗腐皮镰刀菌型真菌性角膜炎方面效果显著,CXL治疗后角膜溃疡病灶缩小,临床评分降低,减轻了真菌对组织的破坏,但对腐皮镰刀菌的生长无明显抑制作用。2、核黄素紫外光介导的角膜胶原交联可以降低真菌性角膜炎过程中MMP-9的表达活性,这可能是CXL治疗后角膜组织破坏减轻的物质基础。