生地中梓醇富集纯化工艺路线及降血糖活性功能评价

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糖尿病是因体内的胰岛素相对或绝对分泌不足,进而导致一系列糖代谢紊乱的一类综合病症,其基本生化特征为持续性高血糖。目前,西药治疗糖尿病的疗效确切,但各种西药都有一定的肝、肾损害等副作用,且不能有效控制并发症。而中药治疗糖尿病的优势就在于疗效稳定,作用温和,副作用少,并能有效防治多种并发症。地黄为玄参科植物地黄的新鲜或干燥块根,在我国有近两千年的应用历史,始载于《神农本草经》,列为上品,为我国常用补益中药。一直以来生地被誉为治疗糖尿病的“圣药”,有滋阴清热、补血止血之功效,临床应用极为广泛。当前,对生地的化学成分及药理作用研究较为透彻,研究表明环烯醚萜类化合物和多糖是生地中的主要化学成分和活性部位,而梓醇又是生地中含量最高的环烯醚萜类化合物,具有抗癌、神经保护、抗炎、利尿、降血糖及抗肝炎病毒等作用。因此,吸引了众多科技工作者的注意,人们在梓醇提取分离的生产工艺上进行了大量研究,但由于地黄中成分众多,而梓醇含量又较低,且众多环烯醚萜类物质结构相近,极性较大,梓醇的化学稳定性又很差,因此规模化生产纯度在90%以上的梓醇难度较大,限制了梓醇的研究及工业化开发。本文对梓醇的富集纯化工艺进行了初步的研究,并对生地及梓醇进行了降血糖活性的功能性评价。本课题的主要研究内容:(1)在建立梓醇含量测定的方法基础上,以梓醇得率为考察指标,选用正交实验筛选出梓醇的最佳提取工艺;(2)通过对D101,HPD600等10余种吸附材料进行比较,选择吸附量最大的吸附材料;(3)采取95%乙醇回流的方式对筛选出的吸附材料进行洗脱;(4)应用高血糖小鼠模型对提取出的梓醇进行降糖活性等的研究;(5)对提取出的梓醇进行急性毒性实验。通过以上实验,得到以下结果:(1)梓醇的最佳提取工艺为10倍量90%乙醇回流提取两次,每次1h;(2)应用HPLC检测D101等10余种树脂吸附后剩余梓醇量,选出活性C为实验用吸附材料;(3)解吸方式为95%乙醇回流两次,每次2h,结果显示有60%梓醇能被洗脱下来,剩余无法解吸梓醇推测是为活性C不可逆吸附;(4)动物实验结果表明,梓醇能明显降低四氧嘧啶致糖尿病小鼠的血糖水平,提高糖尿病小鼠的糖耐量;运用生化试剂盒对小鼠血清进行检测,结果表明梓醇能明显提高糖尿病小鼠血液抗氧化能力,且呈剂量依赖关系。
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