白花前胡和川芎原生质体的制备及其融合研究

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目的:利用植物体细胞杂交技术摸索中药植物白花前胡和川芎的体细胞融合条件,为中药植物原生质体融合提供普遍应用可能性。方法:白花前胡的悬浮细胞团在续代培养3-7天后过滤,去掉单细胞和较小的细胞团,用无激素的MS液体培养基冲洗后,放入经滤膜抽滤灭菌的酶混合液中,在25℃的恒温摇床上(52rpm)酶解4.5-5小时,酶解液过滤,滤液离心,弃上清,所收集的原生质体用0.2 mol/LCaCl2洗2次备用;川芎下胚轴切成0.5-1mm小段,按材料与酶液之比1:10放入酶液中,26℃,暗处静置6小时,酶解液过滤去掉残渣,滤液离心,吸去上层酶液,沉淀物用2mL0.2mol/L CaCl2溶液(pH5.6)洗涤2次,去上清液,其沉淀物即为收集的原生质体。将制备的白花前胡与川芎的原生质体,采用电融合的方法进行融合。结果:制备出白花前胡和川芎的原生质体,并有效的进行了融合。结论:该两种药用植物原生质体的融合研究,为中药的种质资源开发、品种改良、优化和良种选育提供理论与实践可能,并为中药现代化研究探索一条新的途径。
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